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目前,测定乳酸含量的分析方法主要是滴定法,该测定方法的原理为:供试品加水溶解后,再精密加入氢氧化钠滴定液(1mol/L)25mL,煮沸5分钟,加酚酞指示液2滴,趁热用硫酸滴定液(0.5mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正,酚酞指示液变红时停止滴定,读出硫酸滴定液使用量,计算乳酸含量。
《发酵饲料中乳酸的测定 高效液相色谱法》主要内容包括范围、规范性引用文件、原理、试剂与材料、仪器和设备、试样制备与保存、测定步骤、分析结果的计算、重复性。该项新的团体标准规定了发酵饲料中乳酸含量高效液相色谱法,适用于发酵饲料中乳酸含量的测定。
利用高效液相色谱法测定发酵饲料中乳酸含量的方法原理为:利用乳酸易溶于水的特点,乳酸加水超声提取后,稀释至适当的浓度,试液过滤膜进高效液相色谱仪经 C18 色谱柱分离,在 210nm 波长下紫外检测器(或性能相当的检测器)检测,外标法计算乳酸的含量。
检测使用的试剂和材料有乙腈、磷酸、0.1%磷酸溶液、氢氧化钠、0.1mol/L 氢氧化钠标准滴定溶液、酚酞、0.1%酚酞指示剂溶液。测定用的仪器和设备包括分析天平、超声波清洗器、微孔滤膜、容量瓶、高效液相色谱仪(配有紫外检测器或二极管阵列检测器)。
测定步骤包括样品溶液制备、高效液相色谱条件、平行试验、空白试验、乳酸标准储备液溶液的制备、高效液相色谱仪测定这几个方面。其中,样品溶液制备过程为:称取试样 1g~5g(精确至 0.0001g),置于 100 mL 容量瓶中,加 60mL 水,在 50℃水浴中超声提取 20 min,冷却至室温,用水定容至刻度,摇匀,过滤,取滤液稀释,使最后稀释液中乳酸的浓度均在工作曲线之内,取部分稀释液过 0.45 um 滤膜,滤液作为试样溶液。
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