6.5 灭菌

每支试管内加入一粒玻璃珠(4.13),盖上试管帽，121℃灭菌5min(商品培养基按标签说明进 行灭菌)。

6.6 接种

将上述试管迅速冷却至30℃以下。用滴管或移液器向上述试管中各滴加一滴(约50uL)接种菌 悬液(6.1.2),其中标准曲线管中的接种空白试管S1除外。

6.7 培养

将试管固定在振荡培养箱内，用约140次/min～160次/min的振荡速度，在30℃±1℃振荡培养 22h～24h。

6.8 测定

对每支试管进行视觉检查，接种空白试管S1内培养液应是澄清的，如果出现浑浊，则结果无效。

6.8.1 从振荡培养箱内取出试管，放入灭菌釜内，100℃保持5min,使微生物停止生长。

6.8.2 用接种空白试管S1(6.3)作空白，将分光光度计透光率调到100%(或吸光度A为0),读 出接种空白试管S2(6.3)的读数。再以接种空白试管S2为空白，调节透光率为100%(或A为0), 依次读出其他每支试管的透光率(或吸光度A)。

6.8.3 用涡旋混合器充分混合每一支试管(也可以加一滴消泡剂)后，立即将培养液移入比色皿内进 行测定，波长为540nm～660nm,待读数稳定30s后，读出透光率，每支试管稳定时间要相同。以肌 醇标准品的含量为横坐标，透光率为纵坐标作标准曲线。

6.8.4 根据待测液的透光率，从标准曲线中查得该待测液中肌醇的浓度，再根据稀释因子和称样量计 算出试样中肌醇的含量。透光率超出标准曲线管S3～S10范围的试样管要舍去。

6.8.5 对每个编号的待测液的试管，用每支试管的透光率计算每毫升该编号待测液肌醇的浓度，并计 算该编号待测液的肌醇浓度平均值，每支试管测得的该浓度不得超过该平均值的±15%,超过者要舍 去。如果符合该要求的管数少于所有的四个编号的待测液的总管数的2/3,用于计算试样含量的数据 是不充分的，需要重新检验。如果符合要求的管数超过原来管数的2/3,重新计算每一编号的有效试样 管中每毫升测定液肌醇含量的平均值，以此平均值计算全部编号试样管的总平均值C_x,用于计算试样 中的肌醇含量。

注：绘制标准曲线，既可读取透光率(T%),也可读取吸光度(A)。

7 分析结果的表述

试样中肌醇的含量按式(1)计算：

式中：

X—试样中肌醇的含量，单位为毫克每百克(mg/100g)；

C_x—6.8.5中计算所得的总平均值，单位为微克(ug)；

m—试样的质量，单位为克(g)；

f—稀释倍数。婴幼儿食品和乳品f为250。

以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。

8 精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（一）》

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