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食品中膳食纤维的测定(一)

发布时间:2020-05-15 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:4054

1 范围

本标准规定了食品中膳食纤维的测定方法(酶重量法)。

本标准适用于所有植物性食品及其制品中总的、可溶性和不溶性膳食纤维的测定,但不包括低聚果糖、低聚半乳糖、聚葡萄糖、抗性麦芽糊精、抗性淀粉等膳食纤维组分。

2 术语和定义

2.1 膳食纤维(DF)

不能被人体小肠消化吸收但具有健康意义的、植物中天然存在或通过提取/合成的、聚合度DP≥3的碳水化合物聚合物。包括纤维素、半纤维素、果胶及其他单体成分等。

2.2 可溶性膳食纤维(SDF)

能溶于水的膳食纤维部分,包括低聚糖和部分不能消化的多聚糖等。

2.3 不溶性膳食纤维(IDF)

不能溶于水的膳食纤维部分,包括木质素、纤维素、部分半纤维素等。

2.4 总膳食纤维(TDF)

可溶性膳食纤维与不溶性膳食纤维之和。

3 原理

干燥试样经热稳定α-淀粉酶蛋白酶和葡萄糖苷酶酶解消化去除蛋白质和淀粉后,经乙醇沉淀、抽滤,残渣用乙醇和丙酮洗涤,干燥称量,即为总膳食纤维残渣。另取试样同样酶解,直接抽滤并用热水洗涤,残渣干燥称量,即得不溶性膳食纤维残渣;滤液用4倍体积的乙醇沉淀、抽滤、干燥称量,得可溶性膳食纤维残渣。扣除各类膳食纤维残渣中相应的蛋白质、灰分和试剂空白含量,即可计算出试样中总的、不溶性和可溶性膳食纤维含量。

本标准测定的总膳食纤维为不能被a-淀粉酶、蛋白酶和葡萄糖苷酶酶解的碳水化合物聚合物,包括不溶性膳食纤维和能被乙醇沉淀的高分子质量可溶性膳食纤维,如纤维素、半纤维素、木质素、果胶、部分回生淀粉,及其他非淀粉多糖和美拉德反应产物等;不包括低分子质量(聚合度3~12)的可溶性膳食纤维,如低聚果糖、低聚半乳糖、聚葡萄糖、抗性麦芽糊精,以及抗性淀粉等。

4 试剂和材料

注:除非另有说明,本标准所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的二级水。

4.1 试剂

4.1.1 95%乙醇(CH3CH2OH)。

4.1.2 丙酮(CH3COCH3)。

4.1.3 石油醚:沸程30℃~60℃。

4.1.4 氢氧化钠(NaOH)。

4.1.5 重铬酸钾(K2Cr2O7)。

4.1.6 三羟甲基氨基甲烷(C4H11NO3,TRIS)。

4.1.7 2-(N-吗啉代)乙烷磺酸(C6H13NO4S∙H2O,MES)。

4.1.8 冰乙酸(C2H4O2)。

4.1.9 盐酸(HCI)。

4.1.10 硫酸(H2SO4)。

4.1.11 热稳定α-淀粉酶液:CAS9000-85-5,IUB3.2.1.1,10000U/mL±1000U/mL,不得含丙三醇稳定剂,于0℃~5℃冰箱储存。

4.1.12 蛋白酶液:CAS9014-01-1,IUB3.2.21.14,300U/mL~400U/mL,不得含丙三醇稳定剂,于0℃~5℃冰箱储存。

4.1.13 淀粉葡萄糖苷酶液:CAS9032-08-0,1UB3.2.1.3,2000U/mL~3300U/mL,于0℃~5℃储存。

4.1.14 硅藻土:CAS68855-54-9。

4.2 试剂配制

4.2.1 乙醇溶液(85%,体积分数):取895mL 95%乙醇,用水稀释并定容至1L,混匀。

4.2.2 乙醇溶液(78%,体积分数):取821mL95%乙醇,用水稀释并定容至1L,混匀。

4.2.3 氢氧化钠溶液(6mol/L):称取24g氢氧化钠,用水溶解至100mL,混匀。

4.2.4 氢氧化钠溶液(1mol/L):称取4g氢氧化钠,用水溶解至100mL,混匀。

4.2.5 盐酸溶液(1mol/L):取&33mL盐酸,用水稀释至100mL,混匀。

4.2.6 盐酸溶液(2mol/L):取167mL盐酸,用水稀释至1L,混匀。

4.2.7 MES-TRlS缓冲液(0.05mol/L):称取19.52g2-(N-吗啉代)乙烷磺酸和12.2g三羟甲基氨基甲烷,用1.7L水溶解,根据室温用6mol/L氢氧化钠溶液调pH,20℃时调PH为8.3,249时调PH为8.2,28℃时调PH为8.1;20℃~28℃其他室温用插入法校正PH。加水稀释至2L。

4.2.8 蛋白酶溶液:用0.05mol/LMES-TRIS缓冲液配成浓度为50mg/mL的蛋白酶溶液,使用前现配并于0℃~5℃暂存。

4.2.9 酸洗硅藻土:取200g硅藻土于600mL的2mol/L盐酸溶液中,浸泡过夜,过滤,用水洗至滤液为中性,置于525℃±5℃马弗炉中灼烧灰分后备用。

4.2.10 重铬酸钾洗液:称取100g重铬酸钾,用200mL水溶解,加入1800mL浓硫酸混合。

4.2.11 乙酸溶液(3mol/L):172mL乙酸,加入700mL水,混匀后用水定容至1L。

 

 

文章来源:《食品安全国家标准汇编检验方法(一)》

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