5 操作步骤

5.1 样品处理

5.1.1 一般样品

取25g(mL)样品(水果、蔬菜、水产品为50g)加入盛有225mL Bolton肉汤的有滤网的均质袋中(若为无滤网均质袋可使用无菌纱布过滤)，用拍击式均质器均质1min～2min,经滤网或无菌纱布过滤，将滤过液进行培养。

5.1.2 整禽等样品

用200mL 0.1%的蛋白胨水中充分冲洗样品的内外部，并振荡2min～3min,经无菌纱布过滤至250mL离心管中，16000g离心15min后弃去上清，用10mL 0.1%蛋白胨水悬浮沉淀，吸取3mL于100mL Bolton肉汤中进行培养。

5.1.3 贝类

取至少12个带壳样品，除去外壳后将所有内容物放到均质袋中，用拍击式均质器均质1min～2min,取25g样品至225mL Bolton肉汤中(1：10稀释),充分震荡后再转移25mL于225mL Bolton肉汤中(1：100稀释)，将1：10和1:100稀释的BoIton肉汤同时进行培养。

5.1.4 蛋黄液或蛋浆

取25g(mL)样品于125mL Bolton肉汤中并混匀(1：6稀释)，再转移25mL于100mL Bolton肉汤中并混匀(1：30稀释)，同时将1：6和1：30稀释的Bolton肉汤进行培养。

5.1.5 鲜乳、冰淇淋、奶酪等

若为液体乳制品取50g；若为固体乳制品取50g加入盛有50mL 0.1%蛋白胨水的有滤网均质袋中，用拍击式均质器均质15s～30s,保留过滤液。必要时调整PH至7.5±0.2,将液体乳制品或滤过液以20000g离心30min后弃去上清，用10mL Bolton肉汤悬浮沉淀(尽量避免带入油层)，再转移至90mL Bolton肉汤进行培养。

5.1.6 需表面涂拭检测的样品

无菌棉签擦拭检测样品的表面(面积至少100cm2以上)，将棉签头剪落到100mL BoIton肉汤中进行培养。

5.1.7 水样

将4L的水(对于氯处理的水，在过滤前每升水中加入5mL 1mol/L硫代硫酸钠溶液)经0.45um滤膜过滤，把滤膜浸没在100mL BoIton肉汤中进行培养。

5.2 预增菌与增菌

在微需氧条件下，36℃±1℃培养4h,如条件允许配以100r/min的速度进行振荡。必要时测定增菌液的PH并调整至7.4±0.2、42℃±1℃继续培养24h～48h。

5.3 分离

将24h增菌液、48h增菌液及对应的1：50稀释液分别划线接种于Skirrow血琼脂与mCCDA琼脂平板上，微需氧条件下42℃±1℃培养24h～48h。另外可选择使用空肠弯曲菌显色平板作为补充。

观察24h培养与48h培养的琼脂平板上的菌落形态,mCCDA琼脂平板上的可疑菌落通常为淡灰色,有金属光泽、潮湿、扁平，呈扩散生长的倾向。Skirrow血琼脂平板上的第一型可疑菌落为灰色、扁平、湿润有光泽，呈沿接种线向外扩散的倾向；第二型可疑菌落常呈分散凸起的单个菌落，边缘整齐、发亮。空肠弯曲菌显色培养基上的可疑菌落按照说明进行判定。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（二）》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。