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微生物学实验中接种技术

发布时间:2021-07-03 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:1251

接种技术是微生物学实验中最常用的基本操作技术,接种就是利用接种工具在无菌条件下将培养物往新的培养基上移植。

(一)接种工具

常用的接种工具有接种针、接种环、接种铲、涂布棒等。接种细菌或酵母菌用接种环或接种针,接种环(或接种针)有一次性的塑料材质的,已灭菌可直接使用,也有铂金或镍铬合金的。如果使用金属材质的,使用前后均应在火焰上彻底灼烧灭菌,灭菌时右手持接种环(或接种针)的木柄或塑料柄,将金属部分直立于火焰中,渐渐下移使金属环(或接种针)烧红,并将接种环(或接种针)和柄之间的金属棒也通过火焰数次。取菌时,必须待接种环(或接种针)冷却后方可使用。接种某些不易和培养基分离的放线菌和真菌时,有时用接种钩或接种铲。用涂布法在琼脂平板上分离单个菌落时需用涂布棒。常用的接种工具见图4-1。


图4-1 常用的接种工具
a.接种针b.接种环c.接种钩d.接种护e.移液管f.滴管g.涂布棒h.微量取液器

(二)常用的接种方法

根据目的不同,可分别采用接种环、接种针、移液管等进行斜面培养基接种、液体培养基接种和半固体培养基穿刺接种等。

1.斜面培养基接种 将微生物从一个斜面培养基接种至另一个斜面培养基上的方法,称为斜面培养基接种。斜面培养基接种主要用于接种纯菌,使其增殖后用以鉴定或保存菌种,操作方法如下:

(1)左手持菌种管与培养基管,斜面皆向上,菌种管在外侧,右手用拿毛笔的姿势持接种环,将铂丝与欲进入试管的柄部通过火焰灭菌。

(2)右手的小指与掌心夹下培养基管的棉塞,第四指与小指夹下菌种管棉塞,管口通过火焰。

(3)接种环伸入菌种管,蘸取少许菌种。

(4)接种环伸入培养基管,在斜面上蜿蜓划线,或者划直线。注意沾有菌种的接种环不可碰管口与其他地方。

(5)管口再通过火焰,并将棉塞塞于原来的试管。

(6)接种环灭菌。

2.液体培养基接种 液体培养基接种基本上与斜面培养基接种法相同,不同之处是,将挑取的菌种移种至液体培养基管中时,斜持试管,将菌涂于液面处管壁上,试管直立以后菌种即在液体内。该法多用于增菌液进行增菌培养,也可用于生化试验前的培养。

3.半固体培养基穿刺接种 半固体培养基接种应使用接种针,接种针的使用方法基本同接种环。接种时,将蘸取菌种的接种针从半固体培养基表面向下穿刺,但不触及管底,接种针从原路抽出。此方法称为“半固体培养基穿刺接种法”。经穿刺接种后的菌种常作为保藏菌种的一种形式,同时,也是检查细菌运动能力的一种方法,只适宜于细菌和酵母的接种培养。

 

 

文章来源:《农产品质量安全检测》

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