北京普天同创生物科技有限公司
有机化合物的正辛醇一水分配系数(Kow)是指平衡状态下化合物在正辛醇和水相中浓度的比值。它反映了化合物在水相和有机相之间的迁移能力,是描述有机化合物在环境中行为的重要物理化学参数,它与化合物的水溶性、土壤吸附常数和生物浓缩因子密切相关。通过对某一化合物分配系数的测定,可提供该化合物在环境行为方面许多重要的信息,特别是对于评价有机物在环境中的危险性起着重要作用。测定分配系数的方法有振荡法、产生柱法和高效液相色谱法。
一、实验目的
1.掌握有机物的正辛醇一水分配系数的测定方法;
2.学习使用紫外分光光度计。
二、实验原理
正辛醇一水分配系数是平衡状态下化合物在正辛醇相和水相中浓度的比值,即:
Kow=Co/Cw
式中Kow——分配系数;
Co——平衡时有机化合物在正辛醇相中的浓度;
Cw——平衡时有机化合物在水相中的浓度。
本实验采用振荡法使对二甲苯在正辛醇相和水相中达平衡后,进行离心,测定水相中对二甲苯的浓度,由此求得分配系数:
Kow=(CoVo-CwVw)/CwVw
式中Co,Cw——分别为平衡时有机化合物在正辛醇相和水相中的浓度;
Vo,VW——分别为正辛醇相和水相的体积。
三、仪器和试剂
1.仪器
紫外分光光度计;恒温振荡器;离心机;具塞比色管:10mL;玻璃注射器:5mL;容量瓶:5mL,l0mL,
2.试剂
四、实验内容及步骤
1.标准曲线的绘制
移取1.00mL对二甲苯于1OmL容量瓶中,用乙醇稀释至刻度,摇匀。取该溶液0.10mL于25mL容量瓶中,再用乙醇稀释至刻度,摇匀,此时浓度为400μL/L。在5只25mL容量瓶中各加入该溶液1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mL和5.00mL,用水稀释至刻度,摇匀。在紫外分光光度计上于波长227nm处,以水为参比,测定吸光度值。利用所测得的标准系列的吸光度值对浓度作图,绘制标准曲线。
2.溶剂的预饱和
将20mL正辛醇与200mL二次蒸馏水在振荡器上振荡24h,使二者相互饱和,静置分层后,两相分离,分别保存备用。
3.平衡时间的确定及分配系数的测定
(1)移取0.40mL对二甲苯于l0mL容量瓶中,用上述处理过的被水饱和的正辛醇稀释至刻度,该溶液浓度为4×104uL/L。
(2)分别移取1.00mL上述溶液于6个10mL具塞比色管中,用上述处理过的被正辛醇饱和的二次水稀释至刻度。盖紧塞子,置于恒温振荡器上,分别振0.5h,1.0h,1.5h,2.0h,2.5h和3.0h,离心分离,用紫外分光光度计测定水相吸光度。取水样时,为避免正辛醇的污染,可利用带针头的玻璃注射器移取水样。首先在玻璃注射器内吸入部分空气,当注射器通过正辛醇相时,轻轻排出空气,在水相中已吸取足够的溶液时,迅速抽出注射器,卸下针头后,即可获得无正辛醇污染的水相。
五、实验数据处理
1.根据不同时间化合物在水相中的浓度,绘制化合物平衡浓度随时间的变化曲线,由此确定实验所需要的平衡时间。
2.利用达到平衡时化合物在水相中的浓度,计算化合物正辛醇-水的分配系数。
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