一、残留分析方法的建立

农药兽药残留的分析首先要有合适的分析方法，根据分析的目的，分析方法可能是定性或定量。定性方法通常用于监管中的快速检测，这类方法要求反应速度快，样品需要量少，同时可进行较多数量的样品检测。免疫分析法具有特异性强的特点，在定性分析方面占有较大的优势，通常制备成试剂盒，按照说明书的指示操作即可。定量分析方法所受影响因素较多，首先要能够提取出样品中所有的农药或兽药，其次提取物的预处理应能有效去除干扰物质而保留被测成分。分离分析效率高且分辨率高，检测器反应灵敏，检测限低，操作条件稳定，最好有实物标样。分析条件的确定包括提取条件选择，预处理方法与条件选择，色谱条件选择，检测器选择。新定量分析方法的建立要进行准确度、精密度、检测限、定量限、选择性、灵敏度和检测范围等指标的研究。

二、农药残留分析

农药的种类繁多，分析方法更可用“海量”描述。一本书无法罗列文献报道的所有方法，这里只列举部分有机磷农药残留量分析的例子。

(1)样品提取：提取剂可以为乙酸乙酯、乙酸乙酯/无水硫酸钠、乙酸乙酯／二氯甲烷、乙酸乙醋／二氯甲烷／无水硫酸钠、乙酸乙酯／乙醇、乙酸乙酯／戊烷或二甲苯、正己烷、丙酮／二氯甲烷／氯化钠、正己烷／乙腈、乙腈、乙腈／乙醇、乙腈／丙酮、丙酮／二氯甲烷／正己烷、丙醇／石油醚、水。

(2）分配方法：乙腈、水／氯化钠、氯化钠盐析、二氯甲烷、正己烷／二氯甲烷、二氯甲烷／氯化钠／水、二氯甲烷／石油醚、石油醚等。

(3）净化方法：过BioBeadsSX一3柱、PL凝胶柱、伯／仲胺键合交换硅胶阴离子柱、硅胶微柱、LC硅胶柱、Florisil柱、C18柱、硅藻土、Envirose一ABC凝胶柱或氨丙基键合柱等，用正己烷／乙酸乙酯、乙酸乙酯、环己烷／乙酸乙酯、丙酮、正己烷、甲苯淋洗、正己烷／丙酮／二氯甲烷等淋洗。肉类或脂质食物样品中的脂肪可以采用冷冻沉淀后去除。

(4）气相色谱分析条件：填充柱可选择DEGS、OV一17、DC一200、OV一101、OV一225、OV一22、SE一30、OV一1701、OV一201、ApiezenN、Ultrabond20SE、QF一1、OV一101＋OV一220、OV一61＋QF一1＋XE60、OV225＋OV一101等；毛细管柱可选择DB一210、CBP一10、DB一17、DB一1、SPB一1、SPB一5、SPB一608、SPB一20、DEGS、OV一lo1、OV一201、5E一30、OV一1701、HP一1、OV一17、SP一2100、DB一1301、CBP一10、RSL一300、CPSill9CB、Ultra2、HP一1、5％苯基甲基硅烷、SP一2250＋SP一2401、SE一54与OV一1701并联、SP一2100与OV一225并联、SP一2100与OV一225并联等；检测器可选氮磷检测器（NPD)、火焰光度检测器(FPD)、电子捕获检测器（ECD)、电导检测器（ELCD),氢火焰离子化检测器(FID)、微波诱导等离子体一原子发射检测器（MIP/AED）及质谱（MS)等。根据原料和被测物的性质配置相应的条件组合。GUMS和HPLUMS尤其适合多残留分析。

三、兽药残留分析

肉禽饲养业中滥用的克伦特罗（俗称“瘦肉精”）为β一兴奋剂（β-agonist)类药物。这是一组选择性β2一肾上腺素受体激动剂，因能与动物机体内大部分组织细胞膜上的β一受体结合而得名。饲料含β一兴奋剂，会在动物体内积累，滞留时间长，烹饪加工很难消除其作用，人类的中毒症状为头晕、心悸、手指震颤，还可引起糖尿病患者发生痛中毒和酸中毒。激素类药物被禁止在饲料中添加。以下以β一兴奋剂的分析为例。

β一兴奋剂残留检测的主要工作在样品处理方面，所用时间占全部分析时间80％以上。样品的处理方法主要是液一液萃取、固相萃取、液相色谱、超临界萃取和透析等方法。β一兴奋剂残留分析的方法中色谱法应用最多，毛细管电泳法亦常用。

(1)样品提取：提取剂有叔丁基甲醚／正丁醇、乙酸乙酯、索楞森缓冲液（pH7)、盐酸、高氯酸／EDTA、Tris缓冲液、磷酸盐缓冲液等。

(2）样品净化：UltrabaseC18柱LC净化，液一液分配；β一葡糖苷酸酶／硫酸酯酶水解，固相萃取净化；固相萃取净化；加氢氧化钡／氯化钡缓冲液透析；免疫亲和色谱净化；或PellisularC18柱痕量富集。

(3)衍生化：三甲基环硼氧烷衍生，碳酰氯衍生，五氟丙酸酐衍生，N，O一双（三甲基硅烷）三氟乙酰胺衍生；N一甲基一N-（叔丁基二甲基硅烷基）三氟乙酰胺衍生（叔丁基对氧氮六环衍生）物；甲基或丁基硼酸衍生；或氯甲基二甲基氯硅烷衍生（2一二甲基硅烷基对氧氮六环衍生物）。

(4）气相色谱条件：流动相，氦气；固定相可以选择DB5毛细管柱、CP一Sil－8毛细管柱、HPSP5毛细管柱、OV一1701毛细管柱、CP一Sil一5CB毛细管柱、PermabondSE一52、WCOTRSL150BP毛细管柱、HP1毛细管柱或OV一1毛细管柱等。

(5）液相色谱条件：文献报道的组合有SymmetryC18柱，0.01moUL醋酸缓冲液（pH4.6)／甲醇，梯度从（70+30）到（30+70),UV245nm检测；Lichrospher100RP一18e分析柱和预柱（5μm)，水／甲醇(66+34）含1％甲酸，40℃，电化学检测；Inertsil5ODS分析柱和预柱（(3μm),0.01mol/L醋酸铵／甲醇，梯度从(95+5）到（20+80)，大气压化学电离（APCI）一MS/MS检测；Nova一PakC18柱(4μm),0.02mol/L醋酸含25mmol/L十二烷基磺酸钠（pH3.5)／乙腈(53＋47)，柱后Bratton一Margall衍生化，Vis494nm/薄层层析和GC一MS检测；LichrospherRP一selectB柱（5μm),0.02mol/L磷酸二氢钾含30μmol/L乙二胺四乙酸（pH3.9)／甲醇(92.5+7.5）或0.02mol/L磷酸盐缓冲液／甲醇(75+25)（克伦特罗）；SpherisorbC18柱（3μm)，溶剂A：水／乙腈／甲醇（95＋2.5＋2.5）含0.1％乙酸和5mmol/L醋酸铵；溶剂B：水／乙腈／甲醇(5+47.5+47.5)含0.1%乙酸和5mmol/L醋酸铵，体积比28:72，离子喷雾(ISP）一MS/MS检测。

四、农药兽药残留分析国家标准

农药兽药和农畜产品的种类繁多，使用方法和残留特征没有明显的规律性，质量和安全监控要求了解和掌握农畜产品和食品中农药兽药的残留量，为了评判和比较，国家制定了相关的检测方法国家标准用于不同的目的，已经发布实施的有，GB/T5009-145一一2003《植物性食品中有机磷和氨基甲酸酷类农药多种残留量的测定》、GB/T5009.199-2003(蔬菜中有机磷和氨基甲酸醋类农药残留量的快速检测》,GB/T19648-2006《水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱一质谱法》、GB/T20769-2008《水果和蔬菜中450种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T19649-2006《粮谷中475种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱一质谱法》、GB/T20770-2008《粮谷中486种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T19426-2006《蜂蜜、果汁和果酒中497种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱一质谱法》、GB/T20771-2008《蜂蜜中486种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T23206-2008《果蔬汁、果酒中512种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱一串联质普法》,GB/T19650-2006《动物肌肉中478种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱一质谱法》、GB/T23376-2009《茶叶中农药多残留测定气相色谱／质谱法》,GB/T23204-2008《茶叶中519种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱一质谱法》,GB/T23205-2008《茶叶中448种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱一串联质谱法》,GB/T5009.19-2008《食品中有机氯农药多组分残留量的测定》、GB/T5009-162-2008《动物性食品中有机氯农药和拟除虫菊醋农药多组分残留量的测定》、GB/T5009.218一一2008《水果和蔬菜中多种农药残留量的测定》,GB/T5009.103-2003《植物性食品中甲胺磷和乙酞甲胺磷农药残留量的测定》,GB/T5009.20-2003《食品中有机磷农药残留量的测定》,GB/T5009.146-2008《植物性食品中有机氯和拟除虫菊脂类农药多种残留量的测定》、GB/T18932.3-2002《蜂蜜中链霉素残留量的测定液相色谱法》、GB/T20758-2006《牛肝和牛肉中睾酮、表皋酮、孕酮残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20756-2006《可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20751-2006((鳗鱼及制品中十五种喹诺酮类药物残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20741-2006《禽肉中地塞米松残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20766-2006《牛猪肝肾和肌肉组织中玉米赤霉酮、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20755-2006《禽肉中九种青霉素类药物残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20752一一2006《猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃代谢物残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20744-2006《蜂蜜中甲硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑留残量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20765-2006《猪肝脏、肾脏和肌肉组织中维吉尼霉素Ml残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20743-2006《猪肉、猪肝和猪肾中杆菌钛残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20753-2006《牛和猪脂肪中醋酸美仑孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮残留量的测定液相色谱一紫外检测法》、GB/T20747-2006《牛和猪肌肉中安乃近代谢物残留量的测定液相色谱一紫外检测法和液相色谱一串联质谱法》、GB/T20754一一2006《禽肉中保泰松残留量的测定液相色谱一紫外检测法》、GB/T20746-2006《牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧和喹乙醇及代谢产物残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20745-2006《畜禽肉中癸氧喹酯残留量的测定液相色谱一荧光检测法》、GB/T20763-2006《猪肾和肌肉组织中乙酰丙嗪、氯丙嗪、氟哌啶醇、丙酰二甲氨基丙吩噻嗪、甲苯噻嗪、阿扎哌隆、阿扎哌醇、咔唑心安残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20759-2006《畜禽肉中十六种磺胺类药物残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20764-2006《可食动物肌肉中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定液相色谱一紫外检测法》、GB/T20742-2006《牛甲状腺和牛肉组织中硫脲嘧啶、甲基硫脲嘧啶、正丙基硫脲嘧啶、它巴唑、巰基苯并咪唑残留量的测定液相色谱一串联质谱法》、GB/T20750-2006《牛肌肉中氟胺烟酸残留量的测定液相色谱一紫外检测法》等。

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