色谱仪

一、气相色谱仪

气相色谱系统包括可控而纯净的载气源（它能将样品带入GC系统进样口，同时还作为液体样品的气化室）、色谱柱（实现随时间的分离）、检测器（当组分通过时，检测器电信号的输出值改变，从而对组分做出响应）和数据处理装置。

气相色谱仪常用的7种检测器为：①氢火焰离子化检测器（FID）用于微量有机物分析；②热导检测器（TCD）用于常量、半微量分析，有机、无机物均有响应；③电子捕获检测器（ECD）用于有机氯农药残留分析；④火焰光度检测器（FPD)用于有机磷、硫化物的微量分析；⑤氮磷检测器（NPD）用于有机磷、含氮化合物的微量分析；⑥催化燃烧检测器（CCD）用于对可燃性气体及化合物的微量分析；⑦光离子化检测器（PID）用于对有毒有害物质的痕量分析。

二、液相色谱仪

同其他色谱过程一样，HPLC也是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换过程。它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。对高沸点、难气化化合物的混合物通过色谱柱和洗脱液选择实现分离。利用混合物在液一固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离后分析鉴定的仪器。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。

现代液相色谱仪由储液器、高压泵、进样器、色谱柱、检测器、温度控制系统、进样系统、信号记录系统和馏分收集器等部分组成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附一解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以数字和图谱形式输出。

常见的液相色谱仪检测器有：①紫外检测器，光源为D2灯，主要用于检测波长小于等于400nm紫外区内具有紫外吸收的成分。②紫外一可见光用检测器，采用D2灯和钨灯作为光源，可检测物质范围宽，吸收光波长为190一900nm，灵敏度很大程度上取决于物质成分，对于检测色素和着色剂等有色成分十分有效。③二极管阵列检测器（DAD)，可收集从紫外区到可见光区的光谱数据，每种物质成分光谱可以确认。④荧光（FL)检测器，可专门用于检测荧光物质，灵敏度高，常用于柱前柱后衍生性检测。⑤示差折光（RI）检测器，可检测到任何与洗出液折射率不同的物质成分，对于紫外区无吸收的成分，但灵敏度较低，不能用于梯度分析。⑥蒸发光散射检测器（ELSD)，将色谱洗脱液雾化后，检测生成微粒物质成分的散射光。对非紫外吸收成分探测灵敏度高。⑦电导检测器(CD)，可检测电离成分，主要用于离子色谱法。⑧电化学检测器（ECD)，可检测到电氧化一还原反应产生的电流，检测电活性物质成分，灵敏度高。⑨Corona⑧电雾式检测器（Corona"CAD)，使洗脱液雾化并检测经过电晕放电处理后的生成微粒成分。检测紫外非吸收成分灵敏度比蒸发光散射检测器高，是一种全新的HPLC通用检测器，适用于制药、食品、工业化学制品、聚合物、生命科学研究、消费品等行业。

色谱试剂

一、固定相

色谱柱是色谱的心脏，样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类，一类是具有吸附性的多孔固体物质，也称为吸附剂；另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液涂布在载体上常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固定相。吸附剂中有硅胶、活性炭、石墨化碳黑、碳分子筛以及氧化铝和分子筛等。高分子多孔小球包括国产的GDX和400系列，国外的Chromosorb与Porpark系列。

二、固定液

固定液大概有几百种，一般常按其极性和化合物结构进行分类。按固定液极性可分为非极性、中极性和强极性三种。非极性固定液的相对极性在0、+1之间，例如常用的固定液有角鲨烷、阿皮松类及甲基硅氧烷类等；中等极性固定液的相对极性在+2、+3之间，这类固定液适宜分离中等极性物质，常用的固定液有邻苯二甲酸二壬酯、聚乙二醇酯等；强极性固定液的相对极性约为＋3、十4，对极性物质溶解度很大，常用的有β，β’-氧二丙腈、聚乙二醇等。

三、高压液相色谱淋洗剂

高压液相色谱淋洗剂又称流动相或洗脱剂，是高压液相色谱分析中必不可少的试剂，其作用一是携带样品前进，二是为分析样品提供分配相，进而调节选择性，达到混合样品的分离。高压液相色谱法根据固定相的类型和分离原理可分为液固吸附色谱法、液一液分配色谱法、离子交换色谱法、凝胶渗透色谱法、亲和色谱法等几大类。一般情况下，不同种类液相色谱选择不同的流动相。极性大的试样用极性强的洗脱剂；极性弱的样品用极性弱的洗脱剂。洗脱剂的极性强弱可用溶剂强度参数（εo）衡量。εo越大表示洗脱剂的极性越强，即洗脱剂对吸附在固定相上溶质的洗脱能力越强。