一、仪器的基本构造

紫外-可见分光光度计都是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号指示系统五个部分构成。

二、仪器类型

紫外-可见分光光度计主要有以下几种类型：单光束分光光度计、双光束分光光度计、双波长分光光度计和多通道分光光度计。

2.1单光束分光光度计

经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液和试样溶液，以进行吸光度的测定。

2.2双光束分光光度计

双光束分光光度计的光路设计基本上与单光束的相似，不同的是在单色器与吸收池之间加了一个斩光器。斩光器把均匀的单色光变成一定频率、强度相同的交替光，一束通过参比溶液，另一束通过试样溶液，然后由检测系统测量即可得到试样溶液的吸光度。

由于采用双光路方式，两光束同时分别通过参比池和试样池，使操作简单，同时也消除了因光源强度变化所引起的误差。

2.3双波长分光光度计

由同一光源发出的光被分成两束，分别经过两个单色器，得到两束具有不同波长（λ1和2λ）的单色光，使两束光以一定的时间间隔交替照射装有试样溶液的吸收池（不需使用参比溶液）。经光电倍增管和电子控制系统，最后测得的是试样溶液在两个波长处的吸光度差值△A，△A=Aλ1-Aλ2，只要λ1和λ2选择适当，△A就是扣除了背景吸收的吸光度差值，此时

△A=Aλ1一Aλ2=（ελ1一ελ2)be

该式表明，△A与试样中被测组分的浓度c成正比，这是双波长法定量测定的依据。

双波长分光光度计不仅可测定高浓度试样、多组分混合试样、混浊试样，而且还可以测得导数光谱。

2.4多通道分光光度计

多通道分光光度计于20世纪80年代初期问世，是一种利用光二极管阵列作检测器、由计算机控制的单光束紫外一可见分光光度计，由光源（钨灯或氘灯）发出的辐射聚焦到吸收池上，光通过吸收池到达光栅，经分光后照射到光二极管阵列检测器上。该检测器含有一个由几百个光二极管构成的线性阵列，可覆盖190-900nm波长范围。由于全部波长同时被检测，而且光二极管的响应又很快，因此可在极短的时间内（≤1s）给出整个光谱的全部信息。这种类型的分光光度计特别适于进行快速反应动力学研究及多组分混合物的分析，在环境及过程分析中也非常重要。近几年来被用作高效液相色谱仪和毛细管电泳仪的检测器。

2.5光导纤维探头式分光光度计

探头是由两根相互隔离的光导纤维组成。钨灯发射的光由其中一根光纤传导至试样溶液，再经镀铝反射镜反射后，由另一根光纤传导，通过干涉滤光片后，由光敏器件接收转变为电信号。探头在溶液中的有效路径可在0.1-10cm范围内调节。此类仪器的特点是不需要吸收池，直接将探头插入试样溶液中，在原位进行测定，不受外界光线的影响。这种类型的光度计常用于环境和过程监测。