一、目的和要求

(1) 了解二乙基二硫代氨基甲酸银光度法测定微量砷的基本原理。

(2) 掌握测定土壤样品中微量砷的方法。

二、原理

在碘化钾和氯化亚锡存在下，+5价砷还原为＋3价砷。用锌与酸作用产生的新生态氢与＋3价砷反应生成气态砷化氢，再用二乙基二硫代氨基甲酸银(AgDDC）-三乙醇胺一氯仿溶液吸收，生成红色胶状物，可在530nm波长处比色测定。反应式如下：

                 H⁺

AsO^3-₄＋I^-—→As³⁺ + I2

              H⁺

I2＋Sn²⁺—→I^-+Sn⁴⁺

                  H⁺

As ³⁺ + Zn —→AsH₃↑十Zn ²⁺

AsH₃＋6AgDDC＋3R₃ N一→6Ag↓＋As(DDC)₃＋3(R₃NH)(DDC)

大量硫化物对测定有干扰，可用乙酸铅脱脂棉除去。

三、仪器与试剂

(1) 砷化氢发生器。

(2) 722型分光光度计。

(3）无砷锌粒(10-20目）。

(4）标准砷溶液。称取0. 13208在105℃烘干的三氧化二砷，加2mL 2mol/L氢氧化钠溶液，微微加热至三氧化二砷溶解，用lmol/L硫酸中和并过量10mL。移入l00mL）容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，即得含砷lmg/mL的溶液。使用时再稀释至lμg/mL。

(5) 20％碘化钾溶液。称取208碘化钾溶于l00mL蒸馏水中，储存于棕色瓶中待用。若溶液变黄需重新配制。

(6) 40%氯化亚锡溶液。称取408氯化亚锡溶于40mL浓盐酸中，必要时可微热使之溶解。冷却后加入60mL水，储于棕色瓶中，加几粒锌粒保存。

(7) AgDDC-三乙醇胺一氯仿溶液。称取1.00gAgDDC，用少量氯仿调成糊状，加入8mL三乙醇胺，再用氯仿稀释至400mL，用力摇动，使之尽量溶解，静置24h后，用定量滤纸过滤，将滤液转入棕色瓶内，储存于冰箱中。

(8) 乙酸铅脱脂棉。将10g脱脂棉浸于100mL 10％乙酸铅溶液中，浸透后风干。

(9）硫酸（分析纯）。

(10）盐酸（分析纯）。

(11）硝酸（分析纯）。

(12）高氯酸（分析纯）。

四、实验步骤

1．标准曲线绘制

取6个砷化氢发生瓶，分别加入浓度为lμg/mL的砷标准溶液0mL、l. 00mL、3. 00mL、 5. 00mL、7. 00mL、10. 00mL，各加水稀释至100mL，再加入13mL 9mo1/L硫酸、2mL 20％碘化钾，摇匀后，加5mL 40%氯化亚锡。摇匀，加入4g的锌粒，发生的砷化氢通入装有4mL AgDDC-三乙醇胺一氯仿吸收液，并在入口处装有乙酸铅脱脂棉的吸收管（注意，反应时砷化氢发生装置必须密封）)。反应完毕后约lh，取出吸收液，用氯仿作参比液，以l cm比色皿在530nm处测吸光度，扣除试剂空白值后绘制标准曲线。

2．样品分析

准确称取0.5g在105℃烘干的土壤样品3份，分别置于砷化氢发生瓶中，加入5mL浓硝酸和1mL浓盐酸，加热至样品基本溶解，然后加入7mL浓硫酸，加热5min，冷却后加5mL过氧化氢，继续加热至冒浓白烟，并使样品呈灰白色为止，取下发生瓶，冷却后加入100mL蒸馏水、2mL 20%碘化钾溶液、5mL 40%氯化亚锡溶液，摇匀，煮沸5-l0min。其后操作步骤同标准曲线的制备，最后测定样品的吸光度。同时，做试剂空白实验，以扣除试剂的影响。

五、数据处理

土壤中的砷含量（mg/kg)=测得砷量（μg)/样品质量（g)

六、注意事项

(1) 在砷化氢发生前，每加一种试剂均需摇匀，吸收管用后要洗净烘干。

(2) +5价砷的还原作用与溶液温度有关，加入氯化亚锡后，应煮沸溶液5-10min 。

(3) 硝酸干扰砷的测定。若试液中有硝酸，需在砷化氢发生前用硫酸去除干净。