蛋白质（大于5 ng/条带）在灰色的背景中呈现黑色的条带。用1%KOH处理印迹膜，然后用PBS冲洗几次，用碱进行短暂的处理，可增强灵敏度。

材料：

印迹转移膜

Tween 20溶液：0.3% (V/V) Tween20，溶于PBS中（每周新鲜配制此溶液，4℃保存）。

印度墨汁溶液：0. 1% (V/V）印度墨汁（Pelikan 17黑），溶于Tween 20溶液中（室温可保存1个月）

塑料盒

1) 将印迹转移膜放在塑料盒中，用水洗涤3次，每次5 min。

2）用Tween 20溶液洗膜4次，每次10 min。

3）用印度墨汁溶液染膜2h或过夜。

4）用水冲洗，直到得到合适的背景，然后空气干燥。