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荧光胺标记

发布时间:2015-09-14 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:643

这种染料很灵敏,可与第免疫印迹联合使用。然而,蛋白质被不可逆地修饰,因为荧光胺与存在的氨基起反应。

材料:

印迹转移膜

碳酸氢钠溶液:100 mmol/L碳酸氢钠,溶于0. 3 % (V/V) Tween20(pH 9. 0 )中(每周新鲜配制此溶液,4℃保存)。

荧光胺染色液:0.25荧光胺(Sigma公司),溶于碳酸氢钠溶液中(每日新鲜配制)。

塑料盒

1) 将印迹转移膜放在塑料盒中,用水洗涤3次,每次5 min。

2)用碳酸氢钠溶液洗膜2次,每次10 min。

3)用荧光胺溶液标记蛋白质条带15 min,使用足够的染色液,以完全覆盖印迹膜。

4)用碳酸氢钠溶液洗膜3次,每次5 min。

5)用水冲洗膜数次。

6)用紫外灯观察转移后的蛋白质。

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