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酵母细胞中脉冲示踪

发布时间:2015-09-18 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:708

(1) YPD培养基:1%酵母提取物,2%蛋白陈和2%葡萄糖。

(2)合成完全培养基(SC) (1 L):1. 3g完全添加混合物(CSM )去除粉末(Qbiogene, Carlsbad, CA),1. 7g不含氨基酸和硫酸按的酵母氮源,5g(NH4)2 SO4和20g葡萄糖或棉子糖。

(3) 20%葡萄糖。

(4) 20%半乳糖。

(5)无L-蛋氨酸CSM培养基(Qbiogene, Cat. No. 4510-712)。

(6) Acid-washed glass beads (425-600μm) (Sigma , Cat. No. G872)。

(7) Western blotting超敏发光液(普利莱基因技术有限公司,Cat.No. P1010 )。

( 8 ) 2×Laemmli缓冲液(l0ml ) :0. 15g Tris碱(终浓度0. 125mmol/L),用HCl将pH调至6.8, 4m1 10% SDS(终浓度4%),1ml甘油(终浓度10%),20mg溴酚蓝(终浓度0.02%),0. 4ml β-巯基乙醇(终浓度4%)。

(9) 50ml无菌离心管。

(10)无菌微量离心管。

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