(1) 含1 g/L葡萄糖、4mmo1/L谷氨酰胺、10％胎牛血清的DMEM培养基。

(2）无L-蛋氨酸和L-半胱氨酸的DMEM培养基（Invitrogen,Carlsbad，CA，Cat. No. 1013024；或Mediatech，Herndon，VA，Cat.No. 17-204-CI)。

(3) 磷酸盐缓冲液（PBS)：配1L用10g NaCl、0.25g KCl、1.5gNa2HPO4 、0. 25g KH2PO4，pH 7.2，高压后室温或4℃保存。

(4）含EDTA的胰酶（Invitrogen，Cat. No. 25200056)。

(5）标记表达35S-蛋白的混合物，包括35S-蛋氨酸和35S-半胱氨酸（Applied Biosystems，Foster City, CA，Cat. No. NEF-772)。

(6) 200mmol/L L-蛋氨酸（用无菌水配制）( Sigma, St. Louis,MO，Cat. No. M2893）。

(7) 200mmo1/L L-半胱氨酸（用无菌水配制）( Sigma, Cat. No.C7780)。

(8) RIPA裂解缓冲液：50mmol/L Tris·HCl, pH 7.5; 150mmo1/LNaCl; 1 % Nonidet P-40（NP-40)；0. 5 % deoxycholate（DOC）和0.1％SDS。

(9）蛋白酶抑制剂混合物：2.5μg/ml丝氨酸蛋白酶抑制剂；2. 5μg/ml胃蛋白酶抑制剂A; 2.5μg/ml亮抑酶肽和2. 5 μg/ml抗蛋白酶。苯甲基磺酰氟(PMSF）用95％的甲醇配制。在使用前将PMSF加入裂解液中，使终浓度为1 mmol/L。

(10) Bradford蛋白浓度测定试剂盒（Bio一Rad, Richmond, CA,Cat. No. 77432A)。

（11）Protein A或Protein G琼脂糖悬浮物：用RIPA缓冲液洗3次Protein A或Protein G琼脂糖悬浮物（Amersham Biosciences，Piscataway，NJ, Cat. No. 17-0974-01或17-0618-01）。用RIPA重悬悬浮物到原始体积4℃保存。

（12）无菌微量离心管（1.5和2ml )。