1. 方法原理

姜黄素（Curcumin）是由植物中提取的黄色色素，以酮型和烯醇型存在。姜黄素不溶于水，但能溶于甲醇、丙酮和冰乙酸中呈黄色。在酸性介质中，与硼结合呈玫瑰红色的络合物，因反应条件不同可形成两种有色络合物，即玫瑰花青普(Rosocyanin )和红色姜黄素（Rubrocurcumin )。前者是两个姜黄素分子和一个硼原子络合而成，检出灵敏度高（其摩尔吸光系数ε=1.80×105)，最大吸收峰在555nm，结构式如下：

红色姜黄素则为一个姜黄素分子、一个草酸分子与硼的络合物，灵敏度较低（ε =4.0×104)，最大吸收峰在540nm。玫瑰花青昔溶于乙醇后，在室温下1-2h稳定。

2．干扰及消除

硝酸盐氮含量大于20mg/L时，产生干扰，必须除去。可取适量水样，加氢氧化钙使呈碱性后，在水浴上蒸发至干，再慢慢灼烧以破坏硝酸盐。再用一定量的0.1 mol/L盐酸溶解残渣，并定容，吸取1.00ml溶液进行测定。当钙和镁的硬度超过100mg/L（以CaCO3计）时，分析结果可能偏高，可将样品通过阳离子交换树脂消除去。经试验，l 0mg的Al3+、Cu2+、Fe3+、K+、Na+、Mg2+、 Mn 2+、PO3-4等对lmg的硼未见干扰。

3．方法的适用范围

本方法的最低检出浓度为0.02mg/L,测定上限为1.0mg/L（相当于5.0mg/L HBO2),适用于饮用水、地表水、生活污水和废水中硼的测定。

4．仪器

①分光光度计，l0mm比色皿。

②恒温水浴锅：温度为55℃±3℃。

③聚乙烯烧杯：50m1。标准系列和水样所用全部蒸发皿，其大小、形状均应用相同，为塑料容器。

④搅棒：塑料棒或在玻璃棒外套以聚乙烯管，并使管端封闭，其长短和蒸发皿相适应。

5．试剂

①硼标准贮备溶液：准确称取1.4111g硼酸（H3BO3）溶于去离子水中，转入1000m1容量瓶中并稀释至标线。此溶液每毫升含1.00mg的HBO2。

②硼标准使用溶液：由上述标准贮备溶液稀释200倍，即得每毫升含0.005mg HBO2,移入聚乙烯瓶中贮存。

③姜黄素一草酸溶液：称取0.040g姜黄素（C21H20O6）和5.0g草酸（H2C2O4·2H2O)于小烧杯内，用95％乙醇分次溶于l00ml容量瓶中，加入4.2ml 6mol/L盐酸溶液，以95%乙醇定容，贮存在暗冷处。姜黄素容易分解，最好当天配制。

④95％乙醇。

6．步骤

(1)样品预处理

对于含硼量为0.10-1.0mg/L的水样，取1.00ml，若水样含硼量过高，则应先行稀释。若含硼量过低，可吸取较多的水样，移入蒸发皿中，加少许饱和氢氧化钙溶液，使之呈碱性后，在水浴上蒸发至干。加入适当体积（例如5m1 )的0.1mol/L盐酸溶液使溶解，吸取1.00ml进行测定。若水样浑浊，可过滤。

(2）样品测定

①显色：吸取1.00ml水样于50ml聚乙烯杯内，加入4.0m1姜黄素一草酸溶液，轻轻旋动聚乙烯杯使之混合，在55℃±3℃的水浴上蒸发至完全干后，继续在水浴上保留15min,取出冷却。用95％乙醇将杯内固体物溶解，并用塑料棒擦洗杯壁，将溶液移入25ml容量瓶内，用95％乙醇稀释至标线。

②测量：用l 0mm比色皿，在540nm波长处，以蒸馏水代替水样，以相同操作步骤进行的空白试液为参比，测量吸光度。用乙醇稀释至标线后，在1h内进行测定。

(3）校准曲线的绘制

分别吸取相当于每毫升含HBO2 0.005mg的标准溶液0、 0.10、 0.20.、0.30、0.40、0.60、0.80、1.00ml于50ml聚乙烯杯内，补加水至1.0ml，以下按样品测定步骤进行显色和测量。

7．计算

硼（HBO2， mg/L)=m/V×1000

式中：m——由校准曲线查得的HBO2量（mg);

V－一水样体积（ml)。

8．精密度和准确度

对含HBO2 1.00mg/L的天然水样，经五个实验室分析，得室内相对标准偏差为1.91%;

室间相对标准偏差为5.84%，相对误差为0.12%；加标回收率为99.1％±14.6%。

9．注意事项

①用本法测定硼时，应严格控制显色条件，姜黄素与硼结合形成玫瑰花青普，需要在无水条件下进行，有水残存会使络合物颜色强度降低。显色时的蒸发条件，如蒸发速度和蒸发时的温度等因素都必须保持一致，否则重现性变差。蒸发至干后继续在同一温度下保持15min，使脱水完全。蒸发和脱水时的常用温度是55℃±30℃,温度更高时，可能导致硼的损失。

②硬质玻璃中常含有硼，试样的预处理和显色操作不能用含硼的玻璃器皿。所使用的玻璃器皿不应与试样溶液作长时间接触。用其他玻璃器皿时，应先进行全程序空白试验，用扣除空白的方法以消除玻璃器皿的影响。

③配制试剂用的水均需用石英蒸馏器重蒸馏过的水或用去离子水。

④蒸发皿从水浴上取下后，擦干皿外壁水迹，随即放于干燥器内，加乙醇定容，比色时再取出。蒸发皿不应长时间暴露在空气中，以免玫瑰花青普因吸收空气中的水分而发生水解，使测定结果不准确。

⑤显色测定中，最好不要中途停顿，否则会使结果不准确。比色过程中，由于乙醇的蒸发损失，使溶液的吸光度值发生改变，故测定应尽可能迅速，或使用带盖的比色皿。