1．方法的适用范围

1)硅胶是一种具有弱酸性的无定形二氧化硅的可再生吸附剂。它可从硅酸钠和硫酸制备而获得。硅胶可用作柱色谱并可从不同化学极性的干扰化合物中分离待测物。

2）一般应用。

①活化：在150-160℃加热数小时，用于碳氢化合物的分离。

②脱活：含有10%-20％水，用作具有离子或非离子特性的大多数功能团的吸附剂，包括生物碱类、糖酯、配糖类、染料、碱金属阳离子、类脂化合物、甘油酯类、甾族化合物、萜烯化合物和增塑剂类。去活硅胶的缺点是甲醇和乙醇溶剂会降低吸附剂活性。

3）特定应用。本方法包括含多环芳烃化合物和衍生的酚类化合物的样品提取液的净化指南。

2．方法摘要

用所需量的吸附剂装填柱。上部装填吸水剂，然后负载待分析的样品。待测物的洗脱用合适的溶剂以实现，使干扰化合物留于柱上，然后浓缩洗脱液。

3．干扰及消除

①在使用此方法之前，对欲测定的化合物应作试剂空白。在将此法应用于实际样品之前，干扰量必须低于方法检测限。

②除本法中所述之外的其它更多的方法对试剂纯化可能是需要的。

4．仪器和设备

①色谱柱：300mm×l0mm内径，底部有硬质玻璃棉和聚四氟乙烯活塞。

注意：烧结的玻璃圆盘在通过严重污染的提取物之后是很难去污的。可购买无烧结圆盘柱，用一个硬质玻璃棉小垫来保护吸附剂。在用吸附剂填充柱之前，先用50m l丙酮，然后用50ml的洗脱溶剂预洗玻璃棉垫。

②烧杯：500ml。

③试剂瓶：500m1。

④马弗炉。

⑤Snyder柱：三球常量。

⑥Snyder柱：二球微量。

⑦沸石。溶剂提取过的，大约10/40目（碳化硅或同等物）。

⑧水浴。加热用的，带同心圆圈盖。可控温度（±5℃ )。水浴应在通风橱中使用。

⑨小瓶。玻璃制，2 ml容量，具聚四氟乙烯衬里的螺旋盖。

10.锥形烧瓶：50和250ml。

5．试剂

①硅胶：100和200目干燥剂。在使用之前，在一个浅玻璃盘中于130℃活化至少16h,用金属箔松松地覆盖盘。

②硫酸钠：粒状，无水（在浅盘中于400℃加热4h纯化）。

③洗脱溶剂：环己烷、己烷、2-丙醇、甲苯、二氯甲烷、戊烷（农药级或类似规格）。

6．样品的采集、保存和处理

7．步骤

1)多环芳烃。

①在可用硅胶净化技术之前，萃取溶剂必须更换成环己烷。加1- l0ml的样品提取物（在二氯甲烷中）和加沸石至一个干净的K-D浓缩管中。加4ml的环己烷并装上一个二球微量Snyder柱。向顶部加0.5ml二氯甲烷预湿柱上部。将微量K-D装置放于沸水浴（100℃）中以使浓缩管部分浸于热水中。调节装置的垂直位置和所需水温，以使在5- l0min内完成浓缩。在正常的蒸馏速度下，柱球内有大量液体流动，但室内不会注满液体。当液体表观体积达0.5ml时，取出K-D装置，让其沥干并冷却至少10min，取下微量Snyder柱，并用少量的环己烷冲洗其底部接头，流入浓缩管内。调整提取物体积至约2m1。

②用二氯甲烷制备l0g活性硅胶悬浮液，将其放入一支10nim内径色谱柱中。轻敲柱子以填实硅胶，流出二氯甲烷，加1-2cm的无水硫酸钠至硅胶之上。

③用40ml戊烷预洗脱柱。所有的洗脱速度应约为2ml/min，弃去洗脱液，正当硫酸钠层将暴露于空气之前，定量转移2ml环己烷样品提取物至柱上，使用另外2m1环己烷来完成转移。在硫酸钠层刚好暴露于空气之前，加25ml戊烷并继续洗脱柱。弃去此戊烷洗脱液。

④然后，用25m1二氯甲烷一戊烷（(2：3)（体积比）洗脱柱流入一支装配l0ml浓缩管的500m1 K-D瓶中。浓缩所收集的级分至所需体积（(1-l0ml)。用HPLC或GC进行分析。本级分中所洗脱的液体组成为：苊、苊烯、蒽、苯并（(a)蒽、苯并（(a)芘、苯并（b)荧蒽、二萘嵌苯、苯并（k）荧蒽、屈、二苯并（a,h )蒽、荧蒽、芴、茚并（(1,2,3-cd)芘、萘、菲、芘。

2）衍生的酚类。

①本硅胶净化步骤进行处理的样品萃取物是已经过五氟节基溴衍生化的萃取液。

②将4.0g的活化硅胶放入一支l0mm内径的色谱柱中。轻敲柱子以填实硅胶并加入约2g的无水硫酸钠于硅胶上。

③用6ml的己烷预洗脱柱。所有的洗提速度应约为2ml/min。弃去洗出液，并在硫酸钠层刚好暴露于空气之前，吸移2ml含有衍生样品或标准的己烷溶液于柱上。用10.0ml的己烷洗脱柱并弃去此洗脱液。

④按顺序用如下溶液洗提柱：10.0ml 15％甲苯的己烷溶液（第1级分）；10.0ml 40%甲苯的己烷溶液（第2级分）；l0.0ml 75％甲苯的己烷溶液（第3级分）和10.0ml 15％异丙醇的甲苯溶液（第4级分）。所有的洗脱混合物都按体积比配制。酚类衍生物的洗脱模式列于表3-6-13中。根据欲测定的特定酚类或干扰物浓度，这些级分可以按需要混合，用气相色谱进行分析。

8．质量控制

①分析者在应用此法于实际样品之前，应证明欲测定的化合物已被定量地回收。

②对于应用此法进行净化的样品提取液，有关的质量控制样品也必须通过此净化方法进行处理。

9．方法性能