2, 4-二氯酚和五氯酚，主要用于化工原料和农药，五氯酚还用于木材附腐剂、植物生长调节剂和除草剂等。目前，五氯酚已被美国EPA列为内分泌扰乱物质，被疾病控制和预防中心、世界野生动物基金会（加拿大）列为潜在的内分泌修正化学物质；2,4-二氯酚被世界野生动物基金会（加拿大）列为内分泌扰乱物质。

1．方法原理

在酸性条件下（pH为2-3)用有机溶剂（二氯甲烷）萃取，经干燥、浓缩、衍生化（三甲基硅烷化）之后，进行GC-MS分析。

2．方法的适用范围

本方法适用于地表水、地下水、海水中的二氯酚和五氯酚的分析测定，水样为1L时，2, 4-二氯酚和五氯酚的检测限分别为0.7ng/L和1.9ng/L。

3．仪器

①气相色谱一质谱联用仪。

②自动进样器。

③旋转蒸发器。

④1-2L分液漏斗。

⑤ 300ml三角烧瓶。

⑥300m1茄形瓶。

4．试剂

①二氯甲烷：残留农药分析纯。

②正己烷：残留农药分析纯。

③丙酮：残留农药分析纯。

④氯化钠：优级纯，400℃下加热6h后自然冷却，保存在干净的试剂瓶中。

⑤无水硫酸钠：优级纯，400℃下加热6h后自然冷却，保存在干净的试剂瓶中。

⑥浓盐酸：优级纯。

⑦衍生化试剂：N, O-双（三甲基硅）三氟乙酰胺，简称BSTFA。

⑧2, 4-二氯酚和五氯酚标准品，纯度99%。

⑨内标化合物：氖代蔡和氖代菲标准品，纯度99%。

⑩标准贮备液（(100mg/L）：准确称取lomg各目标物，分别溶于丙酮中并定容至100m1,保存于冰箱中备用。

11.混合标准使用溶液（(1 μg/ml )：准确移取上述溶液各100μl，用丙酮定容至l0ml。

5．步骤

(1)样品预处理

取1L水样于2L分液漏斗中，用6mol/L HCl调节pH值至2-3，加入30gNaCl（如果为海水，可以不添加），加入50ml二氯甲烷，振荡萃取10min，静置5min后转移出二氯甲烷相，再加入二氯甲烷50ml，重复上述操作。合并有机相，加入少量正己烷，再加入3g无水硫酸钠静置脱水20min，之后过滤转移至茄形瓶中，在旋转蒸发器上浓缩至约lml。再用二氯甲烷转移至试管中，用N：吹脱浓缩至0.5m1。加入100μl的衍生化试剂BSTFA，在室温下静置1h，之后加入10μl的内标溶液（l00μg/ml)，用二氯甲烷定容至1m1,转移至自动进样器用样品瓶中，备GC-MS分析。

(2) GC-MS分析

色谱柱：DB-1石英毛细管柱30m×0.32mm（内径），膜厚 0.25μm 。

色谱条件：50℃(2min) →20℃/min→100℃→10℃/min→200℃→20℃/min→300℃(5min) ;氦气压力：40kPa保持5min，以2kPa/min升至70kPa，保持5min；进样口温度300℃，接口温度270℃；无分流进样，进样时间2min，进样量2μl。

定性分析：全扫描方式，扫描质量范围为35-400amu。

定量分析：选择离子检测，各化合物检测质量数。

(3)校准曲线

分别移取1、5、10、50、100、500μl的工作混合标准使用液（(1 μg/ml）于各试管中，再加入100μl衍生化试剂BSTFA，在室温下静置1h，其余同样品预处理。
在SIM检测方式下，以标准溶液中目标化合物的峰面积与内标的峰面积比对目标化合物的浓度作图，得到该目标化合物的定量校准曲线。

6．计算

根据样品溶液中目标物与内标物的峰面积比，由定量校准曲线得到样品溶液中化合物的浓度。水样中该化合物的浓度计算公式如下：

样品中目标化合物浓度(ng/L)=测定浓度（ng/ml)×衍生化后样品溶液体积（ml)/水样体积（L)

7．方法特性

(1）衍生化

氯代酚等化合物的分子结构中都含有羟基，极性较大，如果不经过衍生化，很容易出现拖尾峰，并且峰形很宽，影响检测重复性和灵敏度。为了得到尖锐的色谱峰、好的重现性并提高检测灵敏度，本方法中采用了使目标化合物全部生成三甲基硅的取代衍生化反应，衍生化试剂为N, O一双（三甲基硅）三氟代乙酰胺（BSTFA)，衍生化反应如下所示：

CH3

▏

R一OH+BSTFA→RO一Si一CH3

▏

CH3

由上反应可见，该反应的关键在于脱水完全，否则会由于少量水分存在而使反应失败。5ng/ml的酚类TMS衍生物的选择离子色谱图，色谱峰尖脱而且对称，灵敏度很高。

(2）检测灵敏度、重现性和回收率配制五个浓度为10ng/ml的标准溶液，与样品的GC-MS分析相同，进行重复测定，结果见表4-4-3，检测限的计算是以该测定计算结果的3s（s为标准偏差）得到的。实验的相对标准偏差(RSD）为2.4%-5.5%，最低检测限为0.67-1.9ng/L (ppt级）。

回收率实验的目的在于检验分析方法的准确度、可靠性。由于酚类化合物分子中含有羟基，酸化水样可以提高样品中酚类化合物的回收率，从而提高了分析方法的准确度。将50μl的混合标准使用液加入到1L矿泉水中，再转移到2L分液漏斗中，其余与样品预处理步骤相同，平行水样的回收率测定，平均回收率为90%-109%，回收率的相对标准偏差为1.7%-6.7%，完全符合QA/QC要求。