北京普天同创生物科技有限公司

  • CNAS实验室认可证书
  • 标准物质定级证书
  • 豫南检测资质认定证书
  • 质量管理体系认证证书
  • 农产品资质证书
  • 伟业计量高企认证证书
  • 中国计量测试学会合作单位
新闻
  • 产品
  • 仪器
  • 新闻
  • 证书
  • 规程
  • 帖子
  • 课堂

在线客服

多管发酵法——水中粪链球菌的测定(B)(一)

发布时间:2015-11-02 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:1205

人和温血动物的粪便都存在有不少的链球菌,通称为粪链球菌(fecalstrepfococcus)。粪链球菌是革兰氏阳性、过氧化氢酶(catalase)阴性,呈短链状的球菌,在链球菌的血清学分族中主要属于兰斯菲尔德(Lancefield)D族。因此,粪链球菌和兰斯菲尔德D族链球菌曾被作为同义词使用。

粪链球菌进入水体后,在水中不再自行繁殖,因此可以作为粪便污染的指示菌。由于人粪便中粪大肠菌群数多于粪链球菌,动物粪便中粪链球菌多于粪大肠菌群,因此在水质检验时根据这两种菌菌数的比值(FC/FS)不同可以推测粪便污染的来源。根据对每个动物个体所产生的粪大肠菌群和粪链球菌的数量估计,可以得出FC/FS的比值。

当比值大于或等于4,则认为污染主要来自人类;如比值小于或等于0.7,则认为污染主要来自温血动物的粪便:如比值小于4而大于2,则为混合污染但以人粪为主;如比值小于1而大于0.7,则为混合污染但以动物粪便为主;如比值小于或等于2而大于或等于1,则难以判定污染来源。为尽量减小对比值错误的解释,要注意以下几点:

①要测量水样的pH值,因为水中的pH在9.0以上或4.0以下时,链球菌的密度会有急剧地改变;

②尽可能靠近污染源采集水样,因为粪链球菌一离开动物寄主后存活时间不长;

③当各种污染源都存在时,利用比值来判定可能不可靠,此时要调查污染的确切来源;

④当粪链球菌的计数低于100个/loom]时,不要使用比值法。

多管发酵法

水中粪链球菌的密度也可采用MPN法估计。此法检测粪链球菌虽然手续较繁杂,但适用于较混浊的水样,或含有有害化学物质(特别是金属物质)或杂菌数过多的水样,但不适用于海水样品。

此法的步骤是将水样接种于叠氮化钠葡萄糖培养液中,叠氮化钠可抑制一般革兰氏阴性细菌的生长,能在此种培养液中生长可认为是粪链球菌推测试验阳性。自推测试验阳性管用接种环接种三环至含有叠氮化钠和乙基紫两种抑制剂的培养液中,如能在此种培养基中生长,表示粪链球菌的证实试验为阳性。

1.培养基

①叠氮化钠葡萄糖肉汤。

②乙基紫叠氮化钠肉汤。

2.步骤

(1)推测试验

①将水样充分混匀后,根据水样污染的程度,接种三个不同量的水样(如l0ml、1m1、0.lml或1m1、0.1m1、0.0lml等)于叠氮化钠葡萄糖培养液内(如接种水样量为l0ml,则可接种于普通浓度的叠氮化钠葡萄糖培养液内),每一不同量水样分别接种五管,即共接种15管。

②混匀后置于37℃恒温箱中培养24h。

③如培养管内未见明显混浊生长,则继续再培养24h。

④经培养24h或48h,在叠氮化钠葡萄糖培养液中呈现混浊有细菌生长,即表示推测试验阳性,需进一步作证实试验。

(2)证实试验

①自推测试验阳性管用接种环(内径3mm)接种三环(或自制一有三个内径3mm环串一起的接种环,则接种一次即可)至乙基紫叠氮化钠培养液中(阳性管继续保留在37℃恒温箱内)。

②于37℃培养24h。

③如于管底部显一紫色沉淀小圆块者,或培养液有明显混浊生长的,表示证实试验阳性,即有粪链球菌存在(凡出现菌膜或絮状生长不应作为阳性)。

④如经24h培养后未见有生长,则自保留在恒温箱中原推测试验阳性管再接种三环至此原培养液内,继续再培养24h,如管底出现紫色沉淀小圆块或呈明显混浊生长的,证实试验亦为阳性。

3.计数及报告结果

根据证实试验阳性的管数,查MPN表,即可得100m1水样中的粪链球菌数,乘10即为1000m1水样中的粪链球菌数。

评论

登录后才可以评论

立即登录
分享到微信
关闭
普天同创
请告知您的电话号码,我们将立即回电

通话对您免费,请放心接听

温馨提示:

1.手机直接输入,座机前请加区号 如18601949136,010-58103629

2.我们将根据您提供的电话号码,立即回电,请注意接听

3.因为您是被叫方,通话对您免费,请放心接听