北京普天同创生物科技有限公司
一、细胞株系运输前准备
(一)高活性细胞准备
扩大培养使细胞进入对数生长中晚期,检查对数期细胞活性,如细胞形态、细胞汇合度等。
以25cm2方瓶培养物作为运输形式时,把握培养瓶内生长的细胞接近汇合。
以冻存管形式运输时,控制冻存密度在2×106-2×107/ml。
(二)告知接收方有关信息
(1)接收后如何处置。
(2)所需培养基种类和血清浓度。
(3)任何特殊添加物。
(4)传代方法。如使用的胰蛋白酶浓度、消化时间、消化温度、传代比例等。
(5)告知接收方细胞株系到达的可能时间,减少细胞在途时间,降低细胞活性受损程度。
二、细胞株系运输方法
(一)短途运输
短途运输的细胞属于活的培养物,在途时间不宜超过24h。
一般使用25cm2方瓶培养物,在培养至对数生长中晚期后,补充新鲜培养液或Hank's缓冲液至充满瓶体。用防水胶带缠绕瓶颈,封装于小塑料袋内。
上述包装后,可随身携带,如放入衣服口袋或手提袋。
短途运输一般使用快递公司提供的运输服务。上述包装后,需再放入有塑料泡沫或气泡衬垫的包装箱内。也可使用易碎物品运输常用的充气包包装。但需在包装外观上注明“禁止冷冻”、“易碎”、“防潮”等字样。
(二)长途运输
使用冻存管形式进行长途运输。
随身携带时可使用液氮运输罐,IOL罐或更小型的液氮罐,但要预先获得相关运输公司的允许放行。细胞活性无任何影响。
快递运输时,包装要求如下:将冻存管放在厚壁的聚丙乙烯泡沫容器内,再置于干冰中运输。干冰放置于隔热盒中,隔热盒大小为30cm×30cm×30cm,壁厚5cm,中间空隙为20cm×20cm×20cm,约需5kg干冰填充中间的空隙。从液氮取出的冻存管,迅速用吸水棉纸包裹以防破裂,放入聚丙乙烯离心管中,旋紧盖子。离心管置于隔热盒中间的空隙,周边有干冰。包装正常,细胞可维持冷冻状态(-50℃)达3d,细胞活性受影响不明显。
三、细胞株系接收
接收寄送的细胞需要做收件检查,核对细胞株系名称、计数在途时间。拆除外包装后,用消毒酒精擦拭培养瓶外表面,注意不能擦除记号笔标识。
镜检是必需的,以便确认寄送到达的培养物是否存在微生物污染,如细菌污染、霉菌污染。镜检还可以初步核对细胞的存活力和生长密度。
符合扩大培养要求时,及时进行扩大培养,以便冻存足够多的冻存管份数,保留相对低的传代代数细胞种子。
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