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关于细胞培养实验室生物安全

发布时间:2015-11-26 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:2714

所谓生物安全,一般指感染性微生物在实验操作中对操作者及环境可能造成的相对危害程度及其控制方法等。

在日常的动物细胞培养中,细胞株系自身可能携带某些寄生病毒,或者原代培养中用于获取细胞材料的组织器官含有潜在的微生物污染。动物细胞培养实验室惯常使用无菌控制良好的洁净间作为操作空间,换气不良时容易存留操作者携带进人的各种微生物,有时使用实验动物,也会引入动物源性微生物。因此,适当的了解实验室生物安全有关知识和要求是非常必要的。

细胞培养实验室一般控制在二级生物安全级别以内,属于基础实验室类型。

在生物安全控制方面,该手册对各个国家都是有益的参考和指南,它可以帮助实验室制订并建立微生物学操作规范,确保微生物资源的安全,进而确保其可用于临床、研究和流行病学等各项工作。

关于实验室生物安全的更多建议可参照世界卫生组织官方网站www.who.int。也可参照我国有关法规和文件。

实验室生物安全操作规范是最基本的实验室操作和程序,也是微生物学操作技术规范的基础。在规划实验室和国家级实验室项目时,一般以这些规程为依据再制订出相应的具体的实验室安全操作的书面程序。

每个实验室都应该采用“安全手册”或“操作手册”,其中定义了已知的和潜在的危害,并规定了特殊的操作程序来避免或尽量减小这种危害。规范的微生物学操作技术是实验室安全的基础,而专门的实验设备仅仅是一种补充,绝不能替代正确的操作规范。下面列出了一些最重要的概念。

1.进入规定

(1)在处理危险度2级或更高危险度级别的微生物时,在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志(图1)。

(2)只有经批准的人员方可进入实验室工作区域。

(3)实验室的门应保持关闭。

(4)儿童不应被批准或允许进入实验室工作区域。

(5)进入动物房应当经过特别批准。

(6)与实验室工作无关的动物不得带入实验室。

2.人员防护

(1)在实验室工作时,任何时候都必须穿着连体衣、隔离服或工作服。

(2)在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时,应戴上合适的手套。手套用完后,应先消毒再摘除,随后必须洗手。

(3)在处理完感染性实验材料和动物后,以及在离开实验室工作区域前,都必须洗手。

(4)为了防止眼睛或面部受到泼溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害,必须戴安全眼镜、面罩(面具)或其他防护设备。

(5)严禁穿着实验室防护服离开实验室(如去餐厅、咖啡厅、办公室、图书馆、员工休息室和卫生间)。

(6)不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。

(7)禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。

(8)禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。

(9)在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。

3.操作规范

(1)严禁用口吸移液管。

(2)严禁将实验材料置于口内。严禁舔标签。

(3)所有的技术操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。

(4)应限制使用皮下注射针头和注射器。除了进行肠道外注射或抽取实验动物体液,皮下注射针头和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。

(5)出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时,必须向实验室主管报告。实验室应保存这些事件或事故的书面报告。

(6)必须制订关于如何处理溢出物的书面操作程序,并予以遵守执行。

(7)污染的液体在排放到生活污水管道以前必须清除污染(采用化学或物理学方法)。根据所处理的微生物因子的危险度评估结果,可能需要准备污水处理系统。

(8)需要带出实验室的手写文件必须保证在实验室内没有受到污染。

4.实验室工作区

(1)实验室应保持清洁整齐,严禁摆放和实验无关的物品。

(2)发生具有潜在危害性的材料溢出以及在每天工作结束之后,都必须清除工作台面的污染。

(3)所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前,必须清除污染。

(4)在进行包装和运输时必须遵循国家和(或)国际的相关规定。

(5)如果窗户可以打开,则应安装可以防止节肢动物进入的纱窗。

5.生物安全管理

(1)实验室主任(对实验室直接负责的人员)负责制订和采用生物安全管理计划以及安全或操作手册。

(2)实验室主管(向实验室主任汇报)应当保证提供常规的实验室安全培训。

(3)要将生物安全实验室的特殊危害告知实验室人员,同时要求他们阅读生物安全或操作手册,并遵循标准的操作和规程。实验室主管应当确保所有实验室人员都了解这些要求。

实验室内应备有可供取阅的安全或操作手册。

(4)应当制订实验用节肢动物和啮齿动物的控制方案。

(5)如有必要,应为所有实验室人员提供适宜的医学评估、监测和治疗,并应妥善保存相应的医学记录。

6.实验室的设计和设施

在设计实验室和安排某些类型的实验工作时,对于那些可能造成安全问题的情况要加以特别关注,这些情况包括:

(1)气溶胶的形成。

(2)处理大容量和(或)高浓度微生物。

(3)仪器设备过度拥挤和过多。

(4)啮齿动物和节肢动物的侵扰。

(5)未经允许人员进入实验室。

(6)工作流程:一些特殊标本和试剂的使用。

在《实验室生物安全手册》中,对于感染性微生物的危险度等级以及与其相对应的生物安全水平、操作规范和安全防护设备要求,一、二、三、四级生物安全水平对设施的差别要求等均有明确说明。

另外,该手册中,还详细描述了基础实验室和防护实验室的生物安全设施布局。

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