台盼蓝拒染实验可以区分活细胞和死细胞，它的原理是利用死亡细胞或受损细胞的细胞膜通透性发生改变来判别细胞生存状况，活细胞拒染而死细胞可以染成蓝色，通过细胞计数的方法可以判断细胞存活率（或死亡率）。但当细胞受损而细胞膜通透性并未发生明显改变时，这时台盼蓝拒染实验的结果是阴性的，这就需要选择一种能反映细胞代谢能力的实验。目前使用较多的方法是MTT还原反应。MTT检测原理为活细胞线粒体中的唬拍酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臢(formazan）并沉积在细胞中，此时只有活细胞和有代谢活化能力的细胞才能产生这种反应，死亡细胞或线粒体受损、濒临死亡的细胞则无此功能，尤其是处于程序性死亡过程中的细胞，其首先受到损伤的正是细胞内的线粒体，而膜通透性则尚未发生明显改变。因此，此时实验结果表现为台盼蓝拒染，而MTT比色法却可灵敏地检测出这种变化。二甲基亚砜(DMSO）能溶解细胞中的甲臢，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数呈正比。但是MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数。MTT法使用酶标仪检测OD值，用待测组与正常组比较，观测细胞活力的相对增加或者下降。该方法操作简单，已广泛用于生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。需要注意的是待测物质本身不能影响细胞还原染料的能力。

在整个实验过程中，细胞必须处于指数生长期，最终细胞浓度应处于MTT光密度测定的线性范围内。由于不同的药物起效时间不同，有些试剂可能起效较快，有的则较慢，所以要适当调整药物的作用时间。若是第一次使用的细胞系，应设立平行对照板，一块板进行细胞计数，绘制生长曲线，另一块板测定MTT一甲臢吸光值，以确保吸光值与细胞数目呈正比。

MTT比色法通常在多孔板中进行。多孔板使用起来比较经济，适于自动操作。其中最常用的是96孔微滴定板，每个孔的生长面积为28-32mm2,可容纳0.1ml或0.2ml培养基，细胞数可达到1×105个。微滴定检测每个样品所需的细胞数相对较少，这就提供了一种可以同时处理大量样品的方法。微滴定不仅能缩短试验时间，更易于自动化操作、数据的收集和分析。然而，微滴定不能将一个群体中细胞间的不同反应与每个细胞的反应程度区别开来，例如一个代谢参数的50％的抑制可能意味着50％的细胞有反应，也有可能是意味着每个细胞均被抑制了50%。微滴定试验（尤其是以比色或放射测定作为最终检测方式的实验）的一个显著特征是可以得到大量的数据，而且这些数据都采用易于用计算机进行分析的格式。然而，需要注意的是无论选用怎样的分析系统都要能看到原始数据以及经过处理的最终数据，因为计算机分析虽然可以节省大量的时间，但是在面对异常数据点时，它不能作出修正，所以需要能分析原始数据。

除MTT外，3H-胸腺嘧啶脱氧核苷（检测DNA合成）,3H-亮氨酸或35S蛋氨酸（检测蛋白质合成），或其他放射性核素标记可以代替MTT还原反应。放射性核素标记可以用微滴定板闪烁计数进行定量。目前有两种闪烁计数方法：①将细胞内含物用胰蛋白酶消化后吸到滤纸上，再用吸引转移装置移至玻璃纤维滤纸上，滤纸干燥后用闪烁仪计数；②将整块板用一个特制的闪烁计数仪计数。目前有很多自动处理技术，如自动分配器、稀释器、细胞收获器和读板仪，大大缩短了每个样品操作所需的时间。事实上，用什么标准来确定细胞活力并不重要，整个实验的设计，如药物处理和恢复的时间、生长周期（细胞密度、生长速率等）等才是至关重要的。