北京普天同创生物科技有限公司
利用衍生化试剂与被测组分发生化学反应的色谱方法称为色谱衍生化。试剂与样品反应后再注入色谱仪的方法,称为柱前衍生化法(prechromatographicderivatizationmethod);样品被色谱分离后再与试剂反应的方法称为柱后衍生化法(postehromatographicderivatizationmethod)。前者是为了分离,后者是为了检测。衍生化反应可以是在线(on-line)的方式,也可以是离线(off-line)的方式,一般柱前衍生化法用离线反应为主,柱后衍生化法用在线反应。
气相色谱几乎都采用柱前衍生化法。通过衍生化反应可以提高被测物的挥发性,增加GC的应用范围;改变被测物的色谱行为,防止色谱峰的拖尾,改善分离度;提高检测的灵敏度,如制备含氟或氯的衍生物,以适用于电子捕获检测器。常用的衍生化反应有:硅烷化衍生化、酯化衍生化、卤化衍生化和酚化衍生化。
高效液相色谱衍生化技术尽管几乎所有的化合物(除气体外)都可被HPLC分离,但其常用的紫外、荧光等检测器为选择型的,很多化合物在这些检测器上无响应。HPLC衍生化的主要目的是改变组分的可测性,提高检测灵敏度和改善选择性;在衍生化技术方面,既可以柱前衍生化又可以柱后衍生化,例如氨基酸的分析。液相色谱分析的衍生化包括紫外衍生化反应、荧光衍生化反应和电化学衍生化反应。
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