(1)原理 磷酸酶是磷酸醋的水解酶，可使单磷脂水解，其反应可根据反应基质不同而异，如用磷酸酚酞为基质，经磷酸酶水解后可释放酚酞，在碱性环境中呈红色。

(2)方法 取待检菌接种于磷酸酚酞琼脂平板上，置350C孵育18-24h，于平皿盖内加1滴浓氨水，熏蒸片刻，观察结果。亦可用液体培养基，经孵育后，向管内加400g/L氢氧化钠溶液1滴，观察结果。

(3）结果 菌落变为红色者为阳性。

(4)应用 测定细菌产生磷酸酶的能力。主要用于致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌的鉴别，前者为阳性，后者为阴性。还有助于克雷伯氏菌属与肠杆菌属的鉴定。