北京普天同创生物科技有限公司
(1)原理 致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶。一种是结合凝固酶,结合在细胞壁上,使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而附着于细菌表面,发生凝集(25s内出结果),可用玻片法测出。另一种是分泌至菌体外的游离凝固酶,作用类似凝血酶原物质,可被血浆中的协同因子激活变为凝血酶,而使纤维蛋白原变成纤维蛋白,从而使血浆凝固。多数致病性葡萄球菌在30min-lh出现明显凝固。国标采用后一种。
(2)方法
①玻片法:取兔血浆和盐水各1滴,分别置于洁净的玻片上,挑取被检菌分别与血浆和盐水混合。
②试管法:取试管1支,各加0.5mL凝固酶试验兔血浆,挑取被检菌或360C18h肉汤培养物0.5mL加人血浆中后混匀,置(36士1)℃培养,定时观察是否有凝块形成,至少观察6h,实验中需同时做已知阳性和阴性对照。
注意事项:①玻片法为筛选试验,阳性、阴性均需进行试管法测定。②血浆必须新鲜。③应使用肝素而非枸缘酸盐作抗凝剂抗凝的血浆。④本试验也可用胶乳凝集试验试剂盒测定。
(3)结果玻片法以血浆中有明显的颗粒出现而盐水中无自凝现象判为阳性(+);试管法以内容物完全凝固,使试管倒置或倾斜时不流动者为阳性(+)。
(4)应用血浆凝固酶试验作为鉴定葡萄球菌致病性的重要指标,也是葡萄球菌鉴别时常用的一个试验。
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