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细菌总数及其测定

发布时间:2016-04-14 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:978

利用血球计数器在显微镜下直接计数是一种常见的微生物计数的方法。因为计数器载片和盖片间的容积一定,所以可以根据显微镜下观察到的微生物数目来计算单位体积内微生物MCP数。

血球计数器简介:血球计数器是一只特制载玻片。玻片上有两个方格网,每一方格网共分九个大方格,其中间的一个大方格用来做微生物计数,所以又称为计数室。计数室的刻度一般有两种:一种是每个大方格分成16个中方格,每中方格又分成25个小方格;另一种是一个大方格分25个中方格,每个中方格又分成16个小方格。不论哪一种,一个大方格,都等分成(25X16或16X25)400个小方格。因为每个大方格边长为lmm,载片与盖片间距离为0.lmm,所以每个计数室((1个大方格)体积为0.lmm3。测出每个中方格菌数,就可以算出一个大方格的数,由此推算出1毫升菌液内所含的菌数。

一个大方格是16个中方格时,应当数4角4个中方格(即100个小方格)的菌数,一个大方格是25个中方格时,除取4角4个中方格外,还要数中央一个中方格(即为80个小方格)的菌数。

检验程序:菌悬液的制备。检查血球计数板。加样品、显微计数检验方法:按平板计数法对样品做合适的稀释度,取其悬液滴加到盖好盖玻片的血球计数器上,置显微镜下观察计数。

计算公式如下。

16X25计数板:

说明:细菌计数器法,因为是在显微镜下计数.所以计数更直接、更方便、更快速。首先,细菌计数器计数不仅可以计数细菌,还可以计数真菌,检出的微生物的种类较多。其次,计数不受培养条件的限制,不论是需氧菌,还是厌氧菌,不论是嗜热菌,还是嗜冷菌。

均可以计数,较为真实。再次,从制样开始到检出结果只需30min,大大提高检出速度。最后,由于是在显微镜下计数,所以无论是活菌还是死菌,不论是单在,还是双在,甚至链状细菌,都可以一一计数,不会出现少计。但是具有卫生学意义的只有活菌,因此可能夸大微生物数量。

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