北京普天同创生物科技有限公司
大肠菌群国际检验方法需3d 时间,为了便于基层和食品快速监测的实际需要,在多年来的研究成果上,于1985年5月在西宁召开的大肠菌群快速检验方法会议上,认可了当前国内应用的三种快速检验方法:TTC显色法、DC试管法和纸片法的准确性和符合率均较高,与发酵法结果相近,并具有快速、简便等优点,18-24h可报告结果。另外重庆市第二防疫站等单位曾试制 DY-2型大肠菌群检测板,方法简便快速。
(1) TTC氯代三苯基四氮唑)显色快速法每份样品以无菌操作接种1mL, 0.1mL及0.01mL各三管于TTC乳糖培养基层中,如接种量为10mL,则用三倍TTC乳糖培养基。接种后置35~37℃温箱培养18~24h,观察TTC乳糖培养液有无红色及产气,红色产气者为阳性,红色不产气或无红色产气者为阴性。根据阳性管数,查对大肠菌群MPN检索表。
(2) DC(去氧胆酸钠)半固体试管快速法选用三个稀释度的样品,每个稀释度吸取三个1mL,分别加入灭菌中试管内,每管1mL,再注入融化并冷至50℃左右的DC半固体培养基3mL。接种10mL样品的试管加入三倍DC培养基5mL,立即将样品与培养基充分混合,待凝固后,置37温箱内培养18~24h,取出观察结果,培养基变橘红色有气泡产生者,为阳性结果,记为“+”;培养基为绿色者,阴性结果;记为“一”。根据阳性管数,直接查对MPN检索表,报告之,而结果为,培养基变橘红色,或有橘红色菌落无气泡和琼脂崩裂现象,记录为“+”;培养基为绿色,有黄色菌落无气泡和琼脂崩裂现象,记录为“±”。这些结果均应挑2~3个可疑菌落接中乳糖发酵管。置37℃培养18-27h根据产酸产气管数查对MPN检索表,报告之。
(3)纸片快速法取三个稀释度样品,每稀释度样品吸取三个1mL分别涂三张检验纸片,然后用手轻轻压平,置37℃培养15h以后观察结果。纸片上出现紫红色菌落,其周围有黄圈者为阳性;纸片变色呈现不典型菌落,结果可疑者,应做复发酵实验进行验证;出现其余结果者均为阳性。根据纸片的阳性片数,查对MPN检索表,报告之。
此外,还有DY-2型大肠菌群快速检测法和疏水网膜法,用于检验食品中大肠菌群及大肠埃希氏菌类,这里不再作介绍。
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