生化需氧量(biochemical oxvrgen demand，BOD)是指由于水中的好氧微生物的繁殖或呼吸作用，水中所含的有机物被微生物生化降解时所消耗的溶解氧的量。微生物分船有机物是一个缓慢的过程。有机物的生化氧化过程可分为含碳物质的氧化(碳化阶段)和含氮物质的氧化(硝化阶段)。有机物的完全生化氧化需要一百多天，要把可降解的有机物全部分解也至少需要20 d。通常规定20℃时5 d中所消耗氧量，以BOD₅表示，单位为mg／L。
              从BOD定义可知，水体要发生生物化学过程必须具备三个条件：①好氧微生物；②足够的溶解氧；③能被微生物利用的营养物质。对于生活污水及性质与其接近的工业废水，硝化阶段大约在5～7 d，甚至在10 d后才显著进行，故目前广泛采用的20℃5 d培养法测定BOD值一般不包括硝化阶段。
              目前，常用的生化需氧量测定方法有稀释与接种法(GB 7488一l987)(CJ／T 54 1999)、微生物传感器快速测定法、活性污泥曝气降解法等。
             (一)稀释与接种法(5 d培养法)
              1．工作原理
              水样经稀释后，在20℃±1℃条件下培养5 d，求出培养前后水样中溶解氧含量，二者的差值即为BOD₅。若水样BOD₅未超过7 mg／L，则不必进行稀释，可直接测定。
              对于不含或少含微生物的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水或经过氯化处理的废水，在测定BOD₅时应进行接种，以引入能降解废水中有机物的微生物。当废水中存在着难被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或有剧毒物质时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。
               2．稀释水和接种稀释水的制备
              对于污染的地面水和大多数工业废水，因含较多的有机物．需要稀释后再培养测定，以保证在培养过程中有充足的溶解氧。其稀释程度应使培养中所消耗的溶解氧大于2 mg／L，而剩余溶解氧在1 mg／L以上。
              稀释水一般用蒸馏水配制，先通入经活性炭吸附及水洗处理的空气，曝气2～8 h，使水中溶解氧接近饱和，然后再在20℃下放置数小时。临用前加入少量氯化钙、氯化铁、硫酸镁等营养盐溶液及磷酸盐缓冲溶液，混匀备用。稀释水的pH应为7．2，其BOD₅。应小于O．2 mg／L。
              如果水中不含或微生物的活性不够时，应于稀释水中接种微生物，即在每升稀释水中加人生活污水上层清液1～10 mL，或表层土壤浸出液20～30 mL，或河水、湖水10～lOO mL。这种水称为接种稀释水。接种稀释水的BOD₅为0．2～1．0 mg／L。
              为检查稀释水和接种稀释水的质量，以及分析人员的操作水平，将每升含葡萄糖和谷氨酸各150 mg的标准溶液以1：50稀释比稀释后，与水样同步测定BOD₅，测得值应在180～230 mg／L，否则应检查原因，予以纠正。
              3．水样的稀释
              对于大部分水样尤其是废水样品BOD₅的测定，都需要进行稀释。稀释的目的是降低有机物的浓度，使整个生化培养过程有足够的溶解氧，提供微生物生存所必备的营养元素，提供废水生化降解足够的活性微生物。通常，当被测水样中含有充足的活性微生物时(如生活污水)，直接采用稀释水进行稀释；当被测水样不含微生物或不含充足的活性微生物时(如工业废水)，则必须使用接种稀释水进行稀释。
              水样稀释倍数应根据实践经验进行估算。T业废水的稀释倍数由COD₅，值分别乘以系数0．075、O．15、O．25获得。通常同时做三个稀释比的水样。
              4．测定结果计算
              水样含有铜、铅、锌、镉、铬、砷、氰等有毒物质时，对微生物活性有抑制，可使用经驯化微生物接种的稀释水，或提高稀释倍数，以减小毒物的影响。如余氯的影响，一般放置1～2 h可自行消失；对游离氯短时间不能消散的水样，可加入亚硫酸钠除去，加入量由实验确定。本法适用于测定BOD₅；大于或等于2 mg／L，最大不超过6 OOO mg／L的水样；大于600O mg／L，会因稀释带来更大误差。
              (二)微生物传感器快速测定法(HJ／T 86—2002)
              参见第九章第三节中“生物传感器”。
              (三)测压法
              在密闭培养瓶中，水样中DO由于微生物分解有机物而被消耗，产生与耗氧量相当的CO₂：。CO₂被碱性物质吸收后，使密闭系统的压力降低，测出此压降，即可求出水样的BOD值。在实际测定中，先绘制．标准葡萄糖一谷氨酸溶液的BOD值和相应的压差关系曲线，然后以此曲线校准仪器刻度，便可直接读出水样的BOD值。
              除上述方法外，还有库仑法、活性污泥法、相关估算法等。

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