薄层色谱法(thin layer chromatography，TLC)是20世纪40年代末发展起来的一种微量的

色谱分析技术，因分离是在一平面薄层上进行的，故名。1938年，Izmailor和Schraiber在显微镜载玻片上涂布氧化铝薄层，将欲分离的物质点样于薄板上，用毛细管吸取展开剂垂直放于样点中心，展开剂自毛细管流出，从而成功地分离了多种植物酒精提取物中的成分。20世纪50年代，K．rehner及Miller等在前人研究的基础上，以硅胶为吸附剂、石膏为黏合剂，将硅胶涂布于玻璃板上制成薄层，并进行物质的分离，这也是现代意义上的薄层色谱法。

    根据固定相的性质和分离机理的不同，TLC可分为吸附薄层法(adsorption TLC)、分配薄

层法(distrIhution TLC)、离子交换薄层法(ion exchang TLC)等，其中，以吸附薄层法和分配薄层法的应用最为广泛。下面对它们的分离机理分别进行简要介绍。

    ①吸附薄层法。把固定相(吸附剂)均匀地涂布在表面光滑的薄层板上，把待分析的试样溶液点在薄层板一端的适当位置上，这一过程称为点样，样液点称为原点。然后将薄板放在密闭的展开槽(chamber)里，将点样端浸人适官的溶剂中，借助于薄层板上吸附剂的毛细管作用，溶剂载着被分离组分向前移动，这一过程称为展开(development)，所用溶剂称为展开剂(developing solvent)。展开时，样品中各组分在固定相与展开剂之间发生连续的吸附、解吸、再吸附、再解吸。由于固定相对不同组分的吸附能力不同，易被吸附的组分相对移动得慢，而难被吸附的组分则相对移动快，经过一段时间，当展开剂前沿到达预定位置后，取出薄层板，吸附力不同的组分在薄层板上可形成彼此分离的斑点。如果组分为无色物质，可通过物理或化学方法显色后定位。

    ②分配薄层法。分配薄层法以液体为固定相。液体固定相被预先附着在载体(一种多孔的化学惰性固体物质)上，然后涂布固定相制板，点样展开，由于被分析物质各组分在固定相和展开剂之间溶解度不同，即分配系数不同，从而被展开剂携带移动的速度也不同，最终将不同组分分离。

    ③离子交换薄层法。离子交换薄层法以离子交换树脂为固定相，通常将离子交换树脂粉碎成200～40O目，再涂布在玻璃、金属薄板等的表面制成薄层板，点样展开。被测物质的各组分与离子交换树脂进行离子交换，交换能力强的组分先交换，交换能力差的组分被展开剂带走后再交换，从而使不同组分分离。

    在薄层色谱中，通常用比移值(retardation factor，Rf)来表示组分在薄层板上的保留情况。

            原点至展开斑点中心的距离

            原点至溶剂前沿的距离

    若Rf=O，表示组分留在原点不动，即该组分不随展开剂移动；若Rf=1，表示该组分不被吸附剂保留，随展开剂迁移到溶剂前沿，故R。的大小在O～1之间。通常适于分离的R，应在0.2～0.8之间。

    Rf值的大小受很多因素的影响。例如，固定相的类型与含水量、薄层板的厚度、展开剂的极性、展开距离、点样量、展开时间、温度、展开槽中溶剂蒸气的饱和程度等。由于很难控制待测组分的实验条件与文献上的实验条件完全一致，因此，在实际工作中常将试样与参考物纯品(标准品)点于同一薄层板上，于完全相同的条件下进行操作和测定，根据测得的相对比移值(R_f,s)进行确证。    

            原点至被测组分斑点中心的距离

             原点至参考物斑点中心的距离

    从上式可知，Rf与R_f,s不同，O≤Rf≤1，而R_f,s可以大于1，也可以小于1。测定时，将被测样品与参考物同时展开。采用Rb进行定性，可以消除一些系统误差。

    TLC作为一种成熟的、应用较广泛的微量快速检测方法，在农药残留测定中有其独特的用处。TLC既是重要的分离手段，又是定性、定量的分析方法。它的特点是：①操作方便，仪器设备简单；②分离能力强，斑点集中，样品用量少；③可在一块薄层板上同时分析几个甚至几十个样品；④分离组分保留在薄层板上，提供重复测定和核实的机会；⑤灵敏度高(最低检出量为0.01～O.1ng)，分析速度较快。