一、实验目的

掌握GC法测定鸡精中3一氯一1，2一丙二醇残留的原理与方法。

二、实验原理

样品中3氯一1，2一丙二醇(3一MCPD)残留经柱色谱分离、净化后，与七氟丁酰咪唑衍生成1，2一二(七氟丁酰氧基)一3一氯丙烷。该衍生物经气相色谱柱分离后，以电子捕获检测器测定，外标法定量。

三、仪器与试材

1．仪器与器材

气相色谱仪(带电子捕获检测器)、旋转蒸发器、涡旋混合器、离心机、石英毛细管色谱柱

(30m×0．32mm，O．25μm)等。

2．试剂

除特别说明外，实验所用试剂均为分析纯，水为去离子水或蒸馏水。．

(1)常规试剂与溶液：正己烷、无水乙醚、乙酸乙酯、七氟丁酰咪唑、无水Na2SO4、。Ex—trelutNT硅藻土、NaCl溶液(20％)、正己烷一无水乙醚(9+1，体积比)。

(2)3一MCPD标准储备液(1．0mg／mL)：称取0．100g3一MCPD标准品(纯度≥99％)，用乙酸乙酯溶解并定容至100mL。

(3)3一MCPD标准系列溶液：用正己烷将3一MCPD标准储备液稀释至0、001μg／mL、0．05μg／mL、0．1μg／mL、0．5μg／mL、1．00μg／mL、3．0／Lg／mL。

3．实验材料

3～4种鸡精，各50g。t

四、实验步骤

1．样品提取与净化．

(i)称取经研细混合均匀的鸡精样品10．00g于100mL烧杯中，加人20mLNa(：l溶液，使之完全溶解并充分混匀。

(2)称取5．00g上述混匀样品于100mI．烧杯中，加5gExtrelut@NT硅藻土，搅拌均匀，装入预先装有1cm高的无水Na2SO4和5gExtrelutNT硅藻土的玻璃色谱柱中，压实后，再充填1cm高的无水Na2SO4。

(3)以80mL正己烷一无水乙醚淋洗色谱柱，流速为3mL／min。

(4)弃淋洗液后，以150mL无水乙醚洗脱，流速为8mL／ml’n，收集洗脱液于250mL圆底烧瓶中，在40℃下用旋转蒸发器浓缩至近干(切勿蒸干)。

(5)以正己烷将浓缩物移入10mL刻度离心管中，用正己烷稀释至5．0mL。‘

2．衍生

(1)将50μg七氟丁酰咪唑加入离心管，塞紧试管塞，用涡旋混合器充分涡旋混合1min后，于70℃恒温30min。

(2)冷却后，补加正己烷至原刻度，加水3mI。，塞紧试管塞，涡旋}昆合1ml‘n，以4000r／min离心3min。

(3)用尖嘴吸管将水层吸掉，重复“加水、涡旋混合、离心、吸去水层”的操作一次。将溶液在40℃下充人小股N2，浓缩至1．0mL。

(4)将浓缩液移入2mL样品瓶中，加入约300mg无水Na2SO4，加塞，充分振摇1min，静置后供气相色谱分析。

(5)分别取5．0mL不同浓度的3一MCPD标准系列溶液于10mL刻度离心试管中，按同样方法进行衍生。同时准备试剂空白，除不加样品外，其他过程与样品的提取与净化和衍生过程相同。

3．测定

(1)标准曲线的绘制：分别取lμL衍生后的标准系列溶液，注入气相色谱仪，在下述色谱条件下测定标准系列溶液的响应峰面积。以标准系列溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

(2)样品的测定：取1μL衍生后样品液和试剂空白液，分别注入气相色谱仪，测定试样的响应峰面积。依据峰面积，在标准曲线上查出样品中3一MCPD的含量。

4．计算

按下式计算样品中3一MCPD的含量：

X=（c1---c2）V/m

式中，X为样品中3一MCPD的含量，mg／kg；c1为从标准曲线上查得的样品中3一MCPD的含量，”gjmI。；c2为从标准曲线上查得试剂空白中3一MCPD的含量，μg／mL；V为样品最终定容的体积，mL；m为样品的质量，g。

五、注意事项

实验步骤中的色谱条件仅作参考，在实际测定中应该根据仪器型号和实验室条件进行调整。