一、分类

梭状芽胞杆菌属（Clostricii um）简称梭菌属，有200多个种和5个亚种，大多为严格厌氧菌，能形成芽胞，芽胞呈正圆形或卵圆形，直径大于菌体，位于菌体中央、极端或次极端，使菌体膨大为梭状而得名。

本属细菌广泛分布于土壤、人和动物肠道及腐败物中。多数为腐生菌，少数为致病菌，在适宜条件下，芽胞发芽形成繁殖体，产生强烈的外毒素和侵袭性酶类，引起人和动物疾病。引起的人类疾病主要有破伤风、气性坏疽、肉毒中毒和伪膜性肠炎等。

破伤风梭菌（C.tetani）是引起破伤风的病原菌，是临床上常见的革兰阳性厌氧芽胞杆菌。

（一）生物学特性

1.形态结构本菌为革兰阳性细长杆菌，大小为(0.5～1.7)um×(2.1～18)um。但培养48 h后，尤其在芽胞形成后，革兰染色镜检变为阴性。有周鞭毛、无荚膜。芽胞正圆形，直径大于菌体，位于菌体顶端，使细菌呈鼓褪状，为本菌典型的形态特征。

2．培养特性专性厌氧，在厌氧血琼脂平板上呈扩散生长，35℃培养 48 h后，菌落扁平、半透明、灰白色、边缘不齐、周边疏松呈羽毛状，有β溶血，不易获得单个菌落，可见薄膜状爬行生长物，如提高琼脂浓度(4％)，可抑制其扩散生长。在庖肉培养基中，肉汤轻度混浊，肉渣部分消化，微变黑，有少量气体，有腐败恶臭。

3．生化反应不发酵糖类，能液化明胶、产生硫化氢、多数菌株产生吲哚不还原硝酸盐，对蛋白质有微弱消化作用。气液相色谱可检出的代谢产物有乙酸、丙酸、丁酸、乙醇和丁醇。

4．抗原构造有菌体（O）抗原和鞭毛（H）抗原，根据鞭毛抗原可分为10个血清型。各型细菌所产生的毒素其生物学活性与免疫学活性均相同，可被任何类型的抗毒素中和。

5．抵抗力芽胞经100℃煮沸1h可完全被杀灭，能耐干热150℃ 1 h,5％石炭酸10～15 h。在干燥的土壤和尘埃中可存活数年。

（二）临床意义

破伤风梭菌广泛存在于土壤、人和动物肠道中，可引起人类的外源性感染。当机体的伤口被污染，或分娩时使用不洁器械剪断脐带等，本菌的芽胞可侵入伤口，发芽变成繁殖体，生长繁殖，产生外毒素，引起破伤风。

该菌无侵袭力，仅在侵入局部生长繁殖，其致病作用完全有赖于所产生的强烈外毒素—破伤风痉挛毒素（tetanospasmin)。该毒素是由质粒编码，属于神经毒素，其毒性极强，仅次于肉毒毒素，不耐热，65℃ 30 min即可被破坏；亦可被肠道中存在的蛋白酶所破坏，所以存在于正常人和动物肠道中不会致病。破伤风梭菌本身不进入血流，但破伤风痉挛毒素可经血液、淋巴吸收到达中枢神经系统，尤其对脑干神经和脊髓前角运动神经细胞有高度亲和力，能与神经节苷脂结合，封闭脊髓抑制性触突，从而阻止抑制性触突末端释放抑制性神经介质，破坏正常的抑制性调节功能，导致肌肉痉挛性收缩，主要表现为骨骼肌痉挛，典型的症状是咀嚼肌痉挛所造成的牙关紧闭、苦笑面容及持续性背部肌肉痉挛（角弓反张）。机体呈强直性痉挛、抽搐、呼吸困难，最终可因窒息而死亡。

（三）微生物学检验

根据患者的病史和典型的临床症状即可作出诊断，一般不需做细菌学检查，在特殊情况下有必要时才进行微生物学检验。

1．检验程序

破伤风梭菌的检验程序见图23-2。

图23-2破伤风梭菌的检验程序

2．标本采集采集感染伤口的脓液、组织液或坏死组织等。

3．直接显微镜检查取脓液或坏死组织等直接涂片、革兰染色镜检，如见革兰阳性杆菌，呈鼓褪状典型形态，可初步报告。

4．分离培养 将标本接种于庖肉培养基中，置75～85℃水浴加热30 min，以杀死标本中所混有的杂菌，于37℃培养2～4天，有生长现象后，转种新鲜的厌氧血琼脂平板，置于厌氧环境培养24 h，破伤风梭菌可呈薄膜状迁徙生长。

5．鉴定 典型的鼓褪状菌体形态，结合在庖肉培养基及厌氧血琼脂平板上的生长现象，分离的细菌不发酵糖类、不还原硝酸盐，能液化明胶、产生硫化氢，多数菌株产生吲哚 。通过动物毒力和保护力试验阳性即可最后鉴定。