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毛癣菌属的微生物学检验

发布时间:2017-09-14 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:2213

一、生物学特性

毛癣菌属(Tricho ph yton)属半知菌亚门丝孢菌纲丝孢菌目从梗孢菌科,有20余种,其中对人致病的有13种,临床上最为常见的是红色毛癣菌(T.rubrum),约占56%,较常见的有须癣毛癣菌(T. mentagrophytes)、许兰毛癣菌(T. schoenleinii )、紫色毛癣菌(T.violaceum)和断发毛癣菌(T. tonsurans)等。毛癣菌属可侵犯皮肤、毛发和指(趾)甲。沙保氏培养基培养后形成丝状菌落,不同的菌种其菌落形态、颜色各异,可呈绒毛状、粉末状或颗粒状等,颜色为白色、红色、橙色或棕色等。镜下可见细长、壁薄、棒状、两端钝圆的大分生孢子以及侧生、散在、呈葡萄状或梨状的小分生孢子。菌丝呈球拍状、螺旋状、鹿角状或破梳状等。

二、临床意义

毛癣菌属易侵犯人体皮肤、指(趾)甲、毛发的角蛋白组织并生长繁殖,能产生数种角质溶解酶而致病,可引起头癣、体癣、甲癣、手癣、足癣、股癣等。皮肤癣菌是接触性传染,不论男女老少,只要反复接触患者均有可能被感染。癣好发于夏、秋季节,入冬后癣菌生长繁殖减慢,临床症状随之减轻,但待春天气温升高后,生长繁殖又趋活跃,临床症状明显。确定治疗后是否痊愈,只有在停药后观察3周,如无任何复发,特别在高发季节,才能确定痊愈,但痊愈后仍可再感染皮肤癣菌。少数过敏体质的皮肤癣病患者可出现超敏反应,表现为癣菌疹。

三、微生物学检验

浅部真菌感染的检查可采取皮屑、指(趾)甲屑、毛发等皮肤的角质性物质,浅部感染真一菌的检验方法主要是直接镜检、分离培养与鉴定、毛发穿孔试验等。

(一)直接镜检

皮屑标本用10%KOH溶液制成湿片,甲屑用25% KOH溶液或25% KOH溶液含5%甘油制成湿片,加盖玻片在火焰上微微加热消化后直接镜检,观察特征性的菌丝和孢子。若皮屑和甲屑中见到透明、有隔,常有分枝的菌丝及成链的关节孢子,三个菌属难以鉴别。不同皮肤癣菌属导致的毛发真菌感染,在病发中可见到发内型抱子或发外型抱子,皮肤癣菌感染的毛发见图29-1,即可诊断为皮肤癣菌感染。毛癣菌属有发外型抱子和发内型抱子,小孢子菌属只有发外型抱子。

图29-1皮肤癣菌感染的毛发

(二)分离培养与鉴定

皮屑、甲屑和病变标本,先用70%的乙醇处理,或在青霉素和链霉素混合液内处理5 min,再用生理盐水洗3次,然后接种于沙保氏斜面培养基,于25℃培养,每周观察菌落形态及颜色,直至第4周。挑取菌落镜下观察菌丝和孢子,也可做棉蓝染色后镜检或做小培养后镜检,根据菌落的特点及镜下的形态特征进行鉴定。必要时还可做其他鉴定,如毛发穿孔试验、脲酶试验等进行鉴定(表29-1)。

表29-1常见皮肤癣菌的鉴定

(三)毛发穿孔试验

将毛发剪成1 cm长节段,置于已加入25 mL蒸馏水和2~3滴10%酵母浸膏液的平皿内,高压灭菌103.4 kPa 10min。将待检皮肤真菌接种于平皿内,置25℃孵育4周,每周观察一次,连续4次。每次取数根毛发置于载玻片上,经乳酸酚棉蓝染色后,置低倍镜下观察。若毛发有裂口或陷凹者为阳性,否则为阴性。每次同时用已知的须癣毛癣菌和红色毛癣菌作阳性和阴性对照,须癣毛癣菌毛发穿孔试验为阳性。

(四)药敏试验

皮肤癣菌除对咪咪类药物(如酮康唑伊曲康唑,氟康唑等)敏感外,还对特比萘芬、阿莫洛芬及环吡酮胺等敏感。临床治疗时常两种药物联合使用。

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