北京普天同创生物科技有限公司
假丝酵母菌俗称念珠菌,生物学分类为半知菌亚门半知菌纲隐球菌目假丝酵母菌属。本属有81个种,其中有11种对人有致病性,并以白假丝酵母菌(C. albicans)为最常见、致病力最强的条件致病性真菌。此外,热带假丝酵母菌(C.tropicalls)、克柔假丝酵母菌(C. krusei)和光滑假丝酵母菌(C.glabrata)也较多引起疾病。
一、生物学特性
白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形,直径为3~6 mim,革兰染色阳性,但着色不均匀。以出芽方式繁殖,形成芽生孢子,孢子伸长形成芽管,不与母体分离,继而形成较长的假菌丝。营养要求不高,在普通琼脂及沙保氏培养基上均生长良好。需氧,室温或37℃培养2~3天后长出类酵母型菌落,表面光滑,呈奶油色或灰白色,带有浓厚的酵母气味。在玉米粉培养基中可长出厚膜孢子。
二、临床意义
白假丝酵母菌广泛分布于自然界,通常存在于人的口腔、上呼吸道、肠道和阴道黏膜中。白假丝酵母菌是重要的条件致病性真菌,当机体抵抗力下降或菌群失调时,白假丝酵母菌可侵犯人体多个部位,引起各种念珠菌病。常见的如下。
1.皮肤念珠菌病 好发于皮肤潮湿和皱褶处,如腋窝、腹股沟、乳房下、会阴部及指(趾)间等部位。可引起皮肤湿疹样症、指(趾)间糜烂症等。
2.黏膜念珠菌病 寄生在口腔、外阴和阴道等部位,引起鹅口疮、口角糜烂、外阴与阴道炎等。以鹅口疮最为常见。
3.内脏念珠菌病 常引起支气管炎、肺炎、食管炎、肠炎、膀胱炎、肾孟肾炎等。偶尔引起败血症。
4.中枢神经念珠菌病 多由其他原发病灶转移而来(呼吸系统及消化系统病灶),可引起脑膜炎、脑脓肿等,后果严重。但不易被发现,病死率高。
三、微生物学检验
(一)标本直接检查
1.直接镜检 取痰、脓汁、局部炎症性分泌物或脑脊液沉淀物等直接涂片,革兰染色后镜检,镜下可见革兰阳性圆形或卵圆形菌体、芽生孢子以及假菌丝,方可确诊。
2.抗原检测 应用免疫印迹法或ELISA,可在患者血中检出白假丝酵母菌细胞壁甘露聚糖,特异性高。
3.抗体检测 用乳胶凝集试验和对流免疫电泳等检测血清中抗白假丝酵母菌抗体。
4.核酸检测 用PCR法扩增白假丝酵母菌DNA后,用分子探针检测,具有较好的敏感性和特异性。
(二)分离培养
将标本接种于沙保氏培养基中,于37℃或25℃培养1~4天后,培养基表面可出现奶油色的类酵母型菌落。镜检可见假菌丝和芽生孢子。
(三)鉴定试验
1.芽管形成试验将白假丝酵母菌接种于0.5~1 mL正常人或动物血清中,37℃孵育1.5~4 h后镜检,可见芽生孢子和芽管形成。热带假丝酵母菌在6h或更长时间亦可形成芽管,但其他假丝酵母菌一般不产生芽管。
2.厚膜孢子形成试验将白假丝酵母菌接种于1%吐温80(Tween 80)玉米粉培养基中,25℃孵育24~48 h后镜检,可见在其菌丝顶端、侧缘或中间形成厚膜孢子。目前认为此试验是鉴定白假丝酵母菌的重要条件。
3.糖同化或发酵试验 假丝酵母菌凡能发酵某种糖,一定能同化该糖,故只需做那些不被发酵糖的同化试验。假丝酵母菌属的同化及发酵试验结果见表30-1。
表30-1假丝酵母菌属的同化及发酵试验结果
注:*表示以往称假热带假丝酵母菌(C. pseudotropicalis) ;△表示菌种变异;+表示比阴性对照长得好;一表示长得不如对照或不发酵;表示发酵产气。
现有商品化的显色培养基如科玛嘉念珠菌显色培养基(CHRO-Magar)可快速鉴定白假丝酵母菌和其他假丝酵母菌。
(四)药敏试验
对两性霉素B,5-FC等药物敏感,但对5-FC极易产生耐药性。临床治疗时常将两种药物联合使用。
(五)动物试验
将1%的白假丝酵母菌1 mL经耳静脉注射于家兔体内,或0.2 mL尾静脉注射于小白鼠体内,观察5~7天,注意动物是否死亡。剖检后见脏器尤其是肾脏有多种小脓肿形成,镜检可见假菌丝和厚膜抱子,即为白假丝酵母菌感染。其他假丝酵母菌对动物无致病性。
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