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风疹病毒、腺病毒、鼻病毒等呼吸道病毒

发布时间:2017-09-20 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:1272

一、风疹病毒

风疹病毒(rubella virus)属披膜病毒科(Togavirus)风疹病毒属(Rubivirus)的唯一成员,1962年Parkman首次分离出该病毒,是引起风疹(又名德国麻疹)的病原体。

(一)生物学形状

风疹病毒呈球形,病毒直径为50~70 nm,核酸单正链RNA,有包膜,核衣壳为二十面体立体对称。包膜上有微小纤突,长5~6 nm。包膜和核衣壳之间,有一圈电子透明带,这是其他披膜病毒所不具有的,病毒包膜刺突有血凝性。风疹病毒只有一个血清型。该病毒的理化特性与其他披膜病毒相似,但在血清学上与它们之间没有任何抗原交又。该病毒可以在多种细胞系生长。兔肾传代细胞系对该病毒敏感,易出现细胞病变,通常用于分离该病毒。此外,Vero细胞也常用于病毒培养。风疹病毒对热、脂溶剂和紫外线敏感。

(二)临床意义

人是风疹病毒唯一的自然宿主。风疹病毒经呼吸道传播,人群普遍易感,以儿童风疹最为常见,通常在2周左右的潜伏期后,出现发热和轻微的麻疹样皮疹,伴耳后和枕下淋巴结肿大等,患者症状一般较轻,无需特殊治疗。成人感染风疹病毒时症状较重,除出疹外,还有关节炎和关节疼痛、血小板减少、出疹后脑炎等。风疹病毒感染最严重的危害是通过垂直传播引起胎儿先天性感染,孕妇在孕期20周内感染风疹病毒对胎儿危害最大,病毒感染通过影响胎儿细胞的正常生长、有丝分裂和染色体结构等,引起流产或死胎,还可以导致先天性风疹综合征(congenital rubella syndrome,CRS),如先天性心脏病、先天性耳聋、白内障等畸形,以及黄疽性肝炎、肺炎、脑膜脑炎等临床表现。风疹病毒自然感染后可获得持久的免疫力,约95%以上的正常人血清中具有保护性抗体,孕妇血清中抗体可以保护胎儿免受风疹病毒感染。

(三)微生物学检验

1.标本采集与处理 早期采取风疹患者的咽拭子、皮疹液、尿液,胎儿羊水或绒毛膜,先天性风疹综合征患儿的尿、咽拭子、脑脊液及死亡婴儿的各种脏器。检测抗体需采集双份血清。

2.分离培养与鉴定 将标本经过处理后接种于原代人胚肾、RK13等细胞,出现CPE后收集病毒,用酶或荧光素标记的单克隆抗体进行鉴定。

3.抗原检测 用免疫荧光法检测胎儿羊水或绒毛膜中的病毒抗原可以进行产前诊断。

4.核酸检测 利用PCR或核酸杂交技术检测病毒核酸。

5.抗体检测 用免疫荧光试验、ELISA检测患者血液中的特异性IgM抗体进行早期诊断,或通过检测双份血清中病毒特异性抗体,当抗体滴度升高不少于4倍时可辅助诊断;有的患者出现皮疹时就能测出其抗体,但有些患者需出疹后4~5天才能检出。CRS患儿一般出生时血清中就有抗风疹病毒IgM抗体和从母体获得的IgG抗体。

二、腺病毒

腺病毒(adenovirus)属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属成员,于1953年由Rowe等人首次分离获得,1962年正式命名。人类腺病毒(human adenovirus)目前有49个血清型,根据其基因的同源性分为A~F6个组(或亚属)。腺病毒能在呼吸道、胃肠道、尿道和眼结膜等细胞中增殖并致病,其感染多属亚临床感染,在淋巴样和腺样组织中引起潜伏感染,在啮齿动物细胞中引起转化感染。

(一)生物学性状

腺病毒没有包膜,直径为70~90 nm,衣壳呈二十面体立体对称,由252个壳粒组成。衣壳内是线状双链DNA分子,约含35000 bp,两端各有长约100 bp的反向重复序列。位于二十面体顶端的12个壳粒组成五邻体。每个五邻体从其基底部分向表面伸出一根末端有顶球的纤突;基底部分有组特异性抗原,可引起细胞病变;纤突与病毒凝集动物红细胞的活性有关。对HeLa细胞和人胚原代细胞培养敏感,能引起明显的细胞病变。腺病毒对理化因素抵抗力较强,对酸、碱、温度、脂溶剂有一定的耐受性,36℃7天其感染性无明显下降,在pH值为6.0~9.5环境中感染力也无明显改变。但紫外线照射30 min或56℃30min可被灭活。

(二)临床意义

腺病毒主要经呼吸道传播,引起上呼吸道感染及腺病毒肺炎。腺病毒肺炎占病毒性肺炎的20%~30%,在北方多见于冬、春两季,南方多见于秋季。由于缺乏腺病毒特异抗体,80%的腺病毒肺炎发生于6个月至2岁的婴幼儿,潜伏期为3~8天,多以急骤发热(39℃以上)、咳嗽、呼吸困难及发绀等呼吸道症状为主,有时出现嗜睡、惊厥、腹泻、结膜炎,甚至心力衰竭等。学龄前期与学龄期儿童腺病毒肺炎的症状较轻,以持续高热为主。其主要病理改变是灶性或融合性、坏死性肺浸润和支气管炎,还伴有中枢神经系统及心脏的间质性炎症与小血管壁细胞增生反应。

(三)微生物学检验

1.标本采集与处理在发病1~2天内采集标本,根据症状可多部位采集,如咽喉、眼分泌物,粪便和尿液、宫颈拭子、脱落细胞刮片、脑脊液和血清等。采集的标本用抗生素处理后迅速接种敏感细胞,或放置在-70℃冻存。

2.标本直接检查刮片、活检等标本经常规处理后,电镜下检查核内腺病毒包涵体或结晶排列。对鼻咽洗液、尿、粪便悬液等标本可用负染电镜技术观察病毒颗粒,也可用免疫电镜技术观察。

3.病毒分离与鉴定标本加抗生素处理,离心取上清液接种于敏感细胞(293,Hep-2或HeLa细胞等),37℃孵育1~2天后可观察到典型CPE,即细胞变圆、团聚、有拉丝现象,最突出的表现是许多病变细胞聚在一起呈葡萄串状。若2周内仍无明显CPE,可盲传或重新分离。

4.抗原检测常用免疫荧光法和ELISA法检测病毒抗原。

5.核酸检测用PCR法检测病毒特异性DNA。

6.抗体检测腺病毒血清学检测方法有ELISA,HI,NT及CF等,常用ELISA法检测双份血清抗体效价,若抗体效价升高不小于4倍时具有诊断意义。

三、鼻病毒

鼻病毒(rhinovirus)属于小RNA病毒科鼻病毒属成员,是普通感冒的病原体,曾将鼻病毒划分在肠道病毒属中,命名为埃可病毒28型。后来发现两属病毒有很大差别,1963年将此病毒命名为鼻病毒,至少有115个血清型。

(一)生物学性状

鼻病毒为无包膜的二十面体结构,基因组为单正链RNA。鼻病毒外部为衣壳,衣壳表面包含四种病毒蛋白,即VP1~VP4。VP1~VP3位于衣壳的表面,VP4一般存在于衣壳和RNA基因组之间。抗体主要是根据VP1~VP3蛋白上的抗原表位来对该病毒进行识别。鼻病毒不耐酸,在pH6.0以下时开始被灭活,pH3.0以下时全部被灭活,鼻病毒能在人二倍体细胞Hep-2, Hela等细胞中生长,最适温度为33℃、最适pH值为7.0,这也是该病毒主要存在于鼻腔的重要原因。鼻病毒感染后出现CPE较慢,一般约为2周,特征为细胞变圆、呈灶状。

(二)临床意义

鼻病毒是普通感冒最重要的病原之一,所引起的症状包括咽喉痛、流涕、鼻塞、打喷嚏和咳嗽。另外一些患者同时会出现肌肉酸痛、疲劳、乏力、头痛、食欲不振等症状。鼻病毒感染有一定的自限性,一般I周左右可自愈。手是主要的传播媒介,其次为飞沫传播,病毒主要在鼻咽腔中复制。愈后可获得一定的免疫力,但维持时间短,且由于病毒型别多,不同型鼻病毒之间很少有交叉保护,因而人可多次患普通感冒。目前对普通感冒尚无特异性预防和治疗方法。

(三)微生物学检验

感染后2~3天内采集标本。鼻咽拭子、鼻黏膜活检组织、鼻咽洗液等标本可用于病毒分离培养,根据病毒性状,特别是对酸稳定性试验以及中和试验鉴定其血清型。抗体检测可采用ELISA法测定急性期和恢复期双份血清抗体效价,若抗体滴度升高不小于4倍时有诊断意义。但由于鼻病毒血清型太多,尚难以进行常规检查。

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