巨细胞病毒

一、生物学特性

人巨细胞病毒（human cytomegalovirus, HCMV）又称人疱疹病毒-5型(HHV-5)，具有典型的疱疹病毒形态和结构特征，病毒颗粒直径为120～200 nm。

病毒感染宿主的范围具有种属特异性，HCMV仅能在人成纤维细胞中增殖，其生长缓慢，复制周期长，出现CPE需要2～6周，表现为细胞肿大、核变大，形成巨大细胞，细胞核内和细胞质中均可形成嗜酸性包涵体。特征性的表现为细胞核内可出现周围绕有一圈“空晕”的大型包涵体，类似“猫头鹰眼”状。

二、临床意义

人是HCMV的唯一宿主，人群中HCMV的感染非常普遍，多数人感染后HCMV可潜伏于唾液腺、乳腺、肾脏、白细胞及其他腺体，长期或间歇性通过唾液、乳汁、尿液、泪液、宫颈及阴道分泌物等排出病毒。因此，其传染源是患者和HCMV隐性感染者；其传染方式主要为人与人之间的密切接触传播、垂直传播、母婴传播，也可通过性接触、输血和器官移植等方式传播。
HCMV感染具有潜伏与活化的生物学特性，一旦感染，将持续终生。虽然HCMV感染发生率较高，但HCMV致病性较弱，对免疫功能正常的个体一般不具有明显致病性。在免疫抑制、免疫缺陷个体或生理性免疫低下者（胎儿和婴儿）中，HCMV感染易引起播散性疾病或单一器官损害。HCMV引起的感染主要表现为以下几点。

1．先天性和围产期感染若妇女怀孕3个月内感染，HCMV可通过胎盘引起胎儿原发性感染，导致死胎或先天性疾病，先天性感染患儿主要表现为黄疽、肝脾肿大、神经系统受损、血小板减少性淤斑等，少数严重者可引起流产、一早产、死胎或出生后死亡。存活儿童常表现为智力低下、神经肌肉运动障碍、耳聋等。

新生儿可通过产道、与母亲等喂养人员的密切接触而引起HCMV感染，由于其体内有通过胎盘获得的抗体，因此，大多数新生儿表现为隐性感染。

2．儿童及成人原发性感染多通过密切接触（如吸乳、接吻、性接触等）和输血等途径感染，常为隐性感染。感染后病毒多潜伏干唾液腺、乳腺、肾脏、白细胞或其他腺体，长期或间歇性地排出病毒。少数患者可表现为巨细胞病毒单核细胞增多症，出现单核细胞增多、发热、肌肉痛、疲劳、肝功能异常等临床表现，但嗜异性抗体阴性，其临床症状轻微，并发症少见。

3．免疫功能低下者感染在艾滋病、器官移植、恶性肿瘤等患者中，由于机体免疫功能低下或长期使用免疫抑制剂，除易引起原发感染外，还可激活潜伏在体内的HCMV，引起肝炎、间质性肺炎、脑膜炎等严重感染。

机体的细胞免疫功能对HCMV感染的发生及发展起重要作用，细胞免疫缺陷者，可导致严重、长期的HCMV感染，并使机体的细胞免疫功能进一步受到抑制。而体液免疫对防御HCMV感染的保护作用不强，HCMV感染虽可刺激机体产生IgG,IgM,IgA抗体，但抗体不能阻止潜伏病毒的激活，不能降低宫内或围产期感染，也不能阻断感染通过母乳途径的传播，但可使病情减轻。由于 IgG抗体可终生持续存在，IgM抗体与急性感染有关，因此，抗体的检测对于HCMV近期感染的诊断和流行病学调查有一定的意义。

三、微生物学检查

1．形态学检查采集唾液、咽喉洗液、尿液、脑脊液、肺泡灌洗液等标本，离心取沉淀物涂片或取活检组织制片，Giemsa染色后镜检，观察有无巨大细胞及细胞核内和细胞质中是否有包涵体出现，结合临床表现可作辅助诊断，但该方法敏感性低，结果阴性也不能排除HCMV感染。有条件者也可用电镜直接检查标本中的病毒颗粒，本方法虽然快速，但其敏感性也不高。

2．病毒分离培养从临床标本中分离病毒是诊断HCMV感染的有效方法。将上述标本接种于人胚肺或成纤维细胞中进行培养，由于病毒生长缓慢，出现CPE需要2.6周，一般需观察至少6周才可作出判断。

3．分子生物学检测采用核酸原位杂交、PCR或RT-PCR方法可检测标本中微量的HCMV DNA，该方法敏感、快速、特异，可用于HCMV感染的快速诊断。

4．免疫学检测采用免疫酶染色或免疫荧光染色等方法直接检测血液中的单核细胞、活检组织等临床标本中的HCMV抗原，外周血单核细胞中检出HCMV抗原，表明有病毒血症存在。另外，应用ELISA或免疫荧光法亦可检测HCMV抗体，抗-HCMV IgM的检出，可以帮助诊断HCMV的近期感染，新生儿血清中查出抗-HCMV IgM，表明有宫内感染。双份血清中特异性IgG含量增高不小于4倍时，有助于临床诊断，同时特异性IgG的检测还可了解人群中HCMV的感染状况。

其他疱疹病毒

（一）、人疱疹病毒6型

1986年首先从AIDS患者血液中分离出人疱疹病毒6型（human herpes virus-6,HHV-6)，其形态结构与疱疹病毒科其他成员病毒相似，HHV-6基因组DNA为160～170kbp，其靶细胞主要为淋巴细胞，可在T细胞、B细胞、单核细胞等细胞中复制增殖，尤其更易感染CD4⁺ T细胞。病毒在淋巴细胞内复制时可产生明显的CPE，并最终导致宿主细胞破裂、溶解；而感染单核-巨噬细胞时，宿主细胞不出现CPE，但病毒DNA可长期在细胞内留存，形成隐性感染。

HHV-6在人群中感染非常普遍，60％以上儿童和成人血清中HHV-6抗体阳性。人感染HHV-6后，病毒可在唾液腺、乳腺、肾脏中潜伏并持续低密度复制。大多数成人唾液中含有该病毒，因此，无症状携带者是主要传染源，可通过唾液、密切接触（接吻、共用餐饮具等）、输血等途径传播。HHV-6原发性感染多发生于6个月至2岁的婴幼儿，感染后多无症状，少数可引起幼儿丘疹或婴儿玫瑰疹。常急性发病，突然出现高热及上呼吸道感染症状，持续4天左右，退热后在颈部和躯千出现淡红色斑丘疹。

器官移植、艾滋病等免疫力低下或免疫抑制患者，其体内潜伏的HHV-6常可被激活而引起急性感染。由于感染者免疫力低下或免疫抑制，HHV-6可引起T细胞的持续感染。

对于HHV-6病原体的检查，早期可收集患儿唾液或外周血单核细胞标本，处理后接种于人脐血或外周血淋巴细胞进行培养以分离病毒；亦可采用间接免疫荧光技术检测HHV-6 IgM和IgG，以确定近期感染与既往感染；或采用原位杂交和PCR技术检测受感染细胞中的病毒DNA,

（二）、人疱疹病毒7型

人疱疹病毒7型(human herpes virus-7, HHV-7)是继HHV-6之后从AIDS患者T细胞中分离出的又一种新型人类疱疹病毒，与HHV-6的DNA同源性很小。HHV-7是一种在人群中普遍存在的人类疱疹病毒，75％健康人的唾液中可检出此病毒，2～4岁儿童的HHV-7抗体阳性率可达50％,HHV-7主要潜伏在唾液腺和外周血单个核细胞中，主要通过唾液、密切接触、输血等途径传播。

HHV-7分离培养条件与HHV-6相似，在体外对CD4⁺ T细胞具有亲和性，可以在PHA刺激的人脐带血淋巴细胞中增殖。CD4分子是HHV-7的受体，抗CD4单克隆抗体可抑制HHV-7在CD4⁺ T细胞中增殖。临床上可采用特异性PCR,DNA分析等分子生物学方法鉴定病毒。

（三）、人疱疹病毒8型

人疱疹病毒8型(human herpes virus-8, HHV-8）是20世纪90年代初通过分子生物学手段从艾滋病伴发卡波氏肉瘤（Kaposi sarcoma, KS)患者瘤组织中发现的一种新型疱疹病毒，形态结构与其他疤疹病毒相似，病毒颗粒大小120～150 nm，病毒DNA长约170 kb。性接触是HHV-8的主要传播方式。由于HHV-8可在B细胞中增殖，故可通过污染的血液传播。

HHV-8感染后以潜伏的状态存在，其基因组编码多种与细胞蛋白同源的蛋白，可扰乱细胞增殖与凋亡的机制，引起细胞“转化”和“永生化”。HHV-8感染与KS的发生、增生性淋巴细胞系统疾病和部分增生性皮肤病密切相关，因此，将HHV-8称为KS相关疱疹病毒(Kaposi sarcoma-associated herpes-virus, KSHV)。HHV-8的检测主要依靠PCR和原位杂交技术，近年来已有报道采用免疫荧光、ELISA、免疫印迹等方法检测血清抗原或抗体。