填充柱气液色谱固定相分为载体和固定液两部分。

(一)填充柱常用载体的性质及处理方法

在气液色谱中，对填充柱固定液必须涂渍在载体上才能发挥它分离混合物的作用，虽然固定液是分离的决定性因素，但是载体也并不是无关紧要的。由于载体结构和表面性质可以直接影响分离效果，一般对载体有以下要求：

①表面应该是化学惰性的，即没有吸附和催化性能；

②表面积应较大(比表面积应大于1m²/g)，孔径分布均匀；

③热稳定性好，有一定的机械强度。

气液色谱中用的载体种类很多，总的可分为硅藻土型与非硅藻土型两类(表8-22)。目前应用比较普遍的是硅藻土型。

表8-22两种硅藻土载体的比较

1．硅藻土型载体

硅藻土型载体分为红色和白色两种。

红色载体是将天然硅藻土粉碎并压成砖形，在900℃以上煅烧(因其具有高温绝热性能，又叫保温砖载体)，由于生成氧化铁，使其具有了特征的红色。红色载体的表面积大(4m²/g)，孔穴密集，孔径小(1um)，结构紧密，机械强度好。它表面活性中心较多，吸附性较大，适于与非极性固定液配合使用分析非极性或弱极性物质。若分析极性物质时，会有色谱峰拖尾现象。

白色载体是向天然硅藻土中加入少量Na₂CO₃助熔剂，其在900℃高温煅烧后，氧化铁变成了无色的硅酸钠铁络合物，使原来浅灰色的天然硅藻土变成白色。白色载体的表面积小(1m²/g)，孔径粗(9um),结构疏松，机械强度不如红色载体。但它表面活性中心显著减少，吸附性小，适于与极性固定液配合使用分析极性或氢键型化合物。另外由于白色载体的催化活性小，能用于较高的柱温。

由于硅藻土载体的表面不是一个光滑的球面，而是凹凸不平分布着许多孔穴，因而它有较大的比表面积，这就保证了固定液可在载体表面形成一层面积相当大的液膜。如果载体表面没有吸附活性中心，这一层液膜可以涂得均匀。但实际上由于载体表面具有硅醇(Si-OH)和硅醚(Si-O-Si)结构，并有少量金属氧化物(如氧化铁)，因此表面存在着氢键和酸碱活性作用点，这就会引起载体吸附，产生化学反应或催化反应。因而在分析样品时，会产生色谱峰拖尾现象，并使保留值发生变化。

为了消除上述现象，往往在分析极性、氢键型、酸性或碱性样品时，对载体需进行预处理，以获得对称的色谱峰和较好的分离结果。一般载体的处理方法如下：

(1)酸洗法当分析酸类和酯类化合物时，用此法可除去铁等金属氧化物的碱性作用点，但不能洗去硅醇结构，所以用酸洗的载体分析极性物质时仍存在拖尾现象。酸洗的方法是：用6mol/L盐酸加热浸泡载体20～30min，然后用水冲洗至中性，于烘箱中烘干备用。酸洗后的载体降低了吸附性，但增加了载体的催化性(如酸洗载体会促使醇类物质酯化)。

(2)碱洗法当分析胺类等碱性物质时，用此法可除去A1₂O₃等酸性作用点。碱洗的方法是：用5％KOH-甲醇溶液浸泡回流载体，再用水冲洗至中性，烘干备用。碱洗载体可能会分解非碱性的醋类。

(3)硅烷化分析极性和氢键型化合物(如水、醇、胺等)时，用二甲基二氯硅烷处理载体，硅烷与载体表面的硅醇、硅醚基团起反应，可除去氢键结合能力，以消除色谱峰拖尾现象。硅烷化的方法是：先把酸洗后的载体在110℃干燥2h，然后称取10g二甲基二氯硅烷，溶于200mL甲苯中，倒入50g酸洗后干燥过的6201载体，摇匀并减压，同时不断摇动，驱掉载体表面气泡，再恢复至常压，静置10min，将溶液抽滤(滤液可用作处理柱管用)，再用 200mL甲苯分几次洗涤，最后用200mL甲醇处理，此时滤液应无色；把处理过的载体置于瓷盘中晾干，然后在80℃烘箱中烘2h。因二甲基二氯硅烷易水解，处理时各种器皿必须干燥。处理好的载体，放在水中应浮在水面上，这是检验硅烷化是否成功的标志。原来的载体表面积比硅烷化后的载体表面积大2～3倍，表面由亲水性变为憎(疏)水性，便于涂渍非极性或弱极性固定液，而极性固定液就不能均匀地涂在载体上。硅烷化后的载体只适干在270℃以下使用。

(4)釉化将欲处理的载体在2％ Na₂CO₃水溶液中浸泡两昼夜，烘干后先在870℃下煅烧3.5h，然后升温至980℃煅烧40min,烘干后即可使用。这种载体的吸附性能低，强度大。当固定液中加入少量去尾剂后，就能分析醇、酸等极性较强的物质，不出现明显的拖尾现象。但在定量分析甲醇和甲酸等物质时，应注意到它们在载体上是否有不可逆的吸附作用。

2．非硅藻土型载体

非硅藻土型载体种类很多，性质也各异(表8-23)。常用的有氟载体、高分子多孔小球、玻璃球、洗涤剂(烷基磺酸苯酯)、素瓷、海砂等。其中以氟载体最重要，常用聚四氟乙烯，它不溶于一般的溶剂，最高使用温度为275℃，在225℃下长时间使用会发生颗粒熔结现象，在290℃以上开始分解并放出有毒的烟。聚四氟乙烯载体的润湿性差，所以选择固定液有一定的限制，另外机械强度差，配制填料和装柱都比较麻烦，要在19℃以下进行操作，一般是把冷却到0℃的氟载体装入柱内，这样就不会有载体的凝集现象。

氟载体的特点是有惰性，适于分析强极性样品(如水、酸、腈类物质)和强腐蚀性物质(如HF、C1₂等气体)。

表8-23非硅藻土型载体性能