(二)填充柱使用的固定液

1．对固定液的要求

在气液色谱中为实现样品中各组分的分离，所用固定液应满足以下要求。

①固定液应是一种高沸点有机化合物，其蒸气压低，热稳定性好，在色谱分析操作温度下呈液体状态。固定液的沸点应比操作温度高100℃左右，否则固定液流失，会缩短色谱柱的使用寿命，还会引起保留值的变化，影响定性检测或引起检测器的本底电流增大。

②在色谱柱的操作温度下，固定液的黏度要低，以保证固定液能够均匀地分布在载体的表面上。一般降低柱温会增加固定液的黏度，降低色谱柱的分离效率。对某些固定液，使用温度不能低于使用的低限温度。如阿匹松L的低限温度为75℃，甲基硅橡胶的低限温度为100～125℃。

③在色谱柱的操作温度下固定液要有足够的化学稳定性，这对高温(200℃以上)色谱柱尤为重要。有些固定液在高温下会变质，并有结构上的变化。

④对所要分离的组分要有高选择性，即对两个沸点相同(或相近)，但属于不同类型的异构体(如正、异构体，顺、反异构体)有尽可能高的分离能力。

2.固定液的分类

在气液色谱中使用的固定液已达1000多种，通常按固定液的组成大体可分为非极性、中等极性、极性、氢键型4类，如表8-24所示。固定液也可按相对极性划分，假设角鲨烷的极性为零，β,β'-氧二丙腈的极性为100，把固定液按相对极性划分，以每20个极性单位为一级，可分为0、+1、+2、+3、+4、+5六个等级，按0～＋5顺序极性不断增强。

表8-24常用固定液分类

1970年W.O．麦克雷诺兹(W.O．McReynolds)为评价固定液的极性，选用10种标准试验溶质：苯、1-丁醇、2-戊酮、1-硝基丙烷、吡啶、2-甲基-2-戊醇、1-碘丁烷、2-辛炔、1,4-二噁烷、顺六氢化茚满，测量它们在欲测固定液极性的柱上和在角鳖烷柱上的保留指数(保留指数定义见定性部分)，然后对每种溶质求出它们的保留指数增量：

△I_i＝I_p-i-I _sq-i

式中I_p-i—第i种标准溶质在欲测极性色谱柱上的保留指数；

I_sq-i—第i种标准溶质在角鳖烷色谱柱上的保留指数；

△I_i—第i种标准溶质的保留指数增量。

W.O．麦克雷诺兹在226种固定液上，测量了10种标准试验溶质的△I_i值，就把这些△I_i值叫作麦克雷诺兹常数，其表示了每种固定液的极性特征，反映了每种固定液与不同性质溶质间的分子间作用力的差异。通常用麦克雷诺兹常数中前五项△I_i(X'、Y'、Z'、U'、S')的总和，来表示每种固定液的平均极性。近年来通过对大量试验数据总结和近代数学方法研究，已发现许多结构相似或结构不同的固定液，都具有相同的色谱分离特性。表8-25为麦克雷诺兹试验探针物质的性质。

表5-25麦克雷诺兹常数中所用的试验探针物质

表8-26为常用固定液的麦克雷诺兹常数。

表8-26麦克雷诺兹常数

注：固定液量20％柱温120℃，各固定液的平均相对极性用前五个试验探针的各个△I_i的加和∑△I_i数值表示；b表示直链烷烃的相对保留值的对数与碳数关系的直线斜率。选自W.O. McReynolds. J Chromatogr Sci,1970,685(8)。