6.试剂

6.1试剂和标样的稳定性

通常而言，当储存在一个阴凉、避光、干燥的环境时，哈希预制试剂和标准溶液可以有很长的有效期。产品标签上详细说明任何特殊的储存需要。

标记试剂的收到日期，最好优先使用较早收到的化学试剂。当不知道试剂是否还在有效期内或对试剂是否有效存有疑问时，可使用标样来检验试剂的有效性。

吸收了水分、二氧化碳或大气中的其他气体，细菌作用，高温或光(与光敏性化合物)都会影响试剂的有效期。在某些情况下，试剂也可能与储存容器发生反应或试剂成分之间也可能发生交叉反应。

6.2试剂空白

在一些测试中，试剂对最后测试结果的影响很大，因此需要在测试时进行补偿。试剂空白是指试剂单独产生的那部分测试结果。试剂空白导致测试结果出现正误差。

大多数试剂都少于0.009个吸光度单位。但有时候生产具有最低空白的试剂是不可能的或不切实际的。当使用这样的试剂时，最好是用高质量的水(去离子水、蒸馏水等)代替样品运行程序来测定试剂空白。试剂空白的结果用浓度单位表达并且从使用同一批试剂的每个样品测试中减去。哈希的分光光度计可以保存试剂空白值并在每次样品分析时自动扣除。只有在第一次测试，或者新到了一批次的试剂，或者怀疑试剂受到污染的时候才需要进行试剂空白检查。

在大多数哈希的测试中，试剂空白很小，因此只需要采用原水样或者蒸馏水调零。这不会明显降低测试的准确性，除非是测试一种含量非常低的成分，那么最好是做如上所述的试剂空白检查。

2.7样品稀释

大多数的哈希比色法测试需用10mL和25mL的样品。但是在一些测试中，由于被分析物含量过高，导致产生的颜色可能太深而无法测量，或由于干扰物质的存在产生意想不到的颜色。那么，就需要稀释原样品并重新测试来获得准确的结果或确定是否有干扰物质存在。

稀释样品的流程如下：①用移液管定量地将待稀释的样品移入一干净的量筒中(为了稀释更加准确，也可用容量瓶)；②在量筒(或容量瓶)中加去离子水到预定体积；③充分混合，使用稀释后的样品进行测试。

表2-3中的样品稀释体积，是使用25mL量筒进行稀释时取样量和放大系数之间的关系。原样品的待测参数浓度等于稀释后样品待测参数的浓度乘以放大系数。

表2-3  样品稀释的体积

①样品量等于或少于10mL时，用一个移液管移取样品至量筒或容量瓶中。

使用一支移液管和100mL的容量瓶可以进行较准确的稀释(见表2-4)。

表2-4  稀释至100 mL的放大系数

(1)用移液管吸取样品到容量瓶中，并用去离子水稀释到预定体积。

(2)用塞子塞住容量瓶并且反转混合。

样品稀释可能影响一种物质干扰的程度。如果稀释倍数增加，则干扰的影响减少。换句话说，如果原始样品在分析之前被稀释，在原始样品中的一种较高含量的干扰物质可能可以被忽略。

举个例子：对于25mL的样品，等于或小于100mg/L的铜不会对该样品的测试产生干扰。如果用相同体积的水稀释样品，多少浓度的铜将不会产生干扰？

样品中的干扰浓度=干扰浓度×稀释因子=100×2=200mg/L

即被稀释的样品中，铜等于或小于200mg/L将不发生干扰。

8.AccuVac安瓿瓶

AccuVac安瓿瓶是真空包装有定量粉末或液态预制试剂的一个具有光学质量的玻璃瓶。

AccuVac安瓿瓶的使用方法如下。

(1)用一个烧杯或其他敞口容器收集样品。

(2)通过下述两种方法之一打断安瓿瓶的尖端。

·使用AccuVac安瓿瓶开瓶器，使用方法见图2-5及说明。

图2-5  AccuVac安瓿瓶开瓶器的使用

·将安瓿瓶的尖端孔插入样品液面下，并在烧杯壁上折断尖端(见图2-6)。一定要保证在样品表面下面足够深处折断，以避免空气进入。

(3)在安瓿瓶尖端折断处盖上瓶盖，反转安瓿瓶几次以溶解试剂。瓶盖可以作为取放安瓿瓶到光度计样品池的手捏位置，以防止破碎的玻璃割伤手。用干净的软抹布擦安瓿瓶以除去指纹等。

(4)将安瓿瓶插入仪器中的样品池中并且直接读出结果。安瓿瓶开瓶器的使用方法如下。

(1)大开口朝上拿好开瓶器。

(2)尖端朝下，轻慢地将安瓿瓶插入到开瓶器中，直到安瓿瓶尖端部位碰到开瓶器的斜面。

(3)用食指和中指夹住开瓶器，慢慢地将安瓿瓶和开瓶器放入到装有样品的容器中，要保证样品浸没安瓿瓶的肩部。

(4)用拇指推安瓿瓶的尾部，直至尖头折断。保证水样充满安瓿瓶，然后取出安瓿瓶和开瓶器。

(5)如果有必要，用清水洗一下安瓶瓶和开瓶器被样品浸湿的部位，然后从开瓶器中取出安瓿瓶。

(6)将折断的玻璃扔到垃圾箱中。

图2-6  AccuVac安瓿瓶的使用

相关链接：实验室稍作规范（一）