北京普天同创生物科技有限公司

  • CNAS实验室认可证书
  • 标准物质定级证书
  • 豫南检测资质认定证书
  • 质量管理体系认证证书
  • 农产品资质证书
  • 伟业计量高企认证证书
  • 中国计量测试学会合作单位
新闻
  • 产品
  • 仪器
  • 新闻
  • 帖子
  • 课堂

在线客服

HPLC几种最常用的主要检测器(一)

发布时间:2018-06-28 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:5361

(1)紫外可见分光检测器(UVD)。它是一种最常用的检测器,基本上所有的HPLC仪器,都会带有UVD。它一般都由光源系统、单色器系统、光电倍增管等元部件组成。UVD的光源系统,一般都是采用氘灯加恒流电源,和钨灯加恒压电源组成;氘灯恒流电源的电流波动1%,则氘灯发出的光通量波动6.7%;钨灯恒压电源的电压波动1%,则钨灯发出的光通量波动3.4%。作者的实践证明:光电倍增管的商压电源波动1%,其放大倍数波动12%左右(一般光电倍增管生产厂商在性能技术指标测试时,加1000V(伏)高压,此时,其放大倍数为100万倍)。从仪器学的角度来看,氘灯恒流电源的电流调整率不好、漂移大,一般是由于电源的元器件发热,或放大器等电路的工作电源不稳引起的;钨灯恒压电源、光电倍增管高压稳压电源等的电压调整率差、漂移大,一般也是由于工作电源模块电源(±15V,±9V或等电路本身)不稳或元器件发热。反之,上述电源的电流调整率差、电压调整率差,多数是因为电源吃不起负载(特别是变压器设计时要高度重视这个问题)。所以,要求在HPLC检测器的电源设计时,要特别注重电压调整率和电流调整率这两个关键技术指标,一般要求电压调整率和电流调整率都达到0.05%。这些问题,都是仪器学理论的核心问题,是HPLC仪器的设计、制造人员需要特别重视的问题。

HPLC的UVD可分为单光路和双光路两种。单光路UVD直接将流动相中所含样品对紫外光的吸收,所引起的输出电信号变化,得到样品浓度的信息;单光路UVD虽说结构简单,但是因为没有对流动相及其样品性质、流速、温度、光源波动等外界因素引起的变化进行调整、补偿的功能,所以其稳定性不好,目前已经很少采用。双光路UVD具有检测光路和参比光路,可以利用参比光路的信号来补偿单光路的缺点。

双光路UVD又分为准双光路和真正的双光路两种。所谓准双光路,就是指具有两束光、一个流动池的UVD,如图2-54中的(a);所谓真正的双光路,是指两束光、两个流动池的UVD,如图2-54中的(e)等。

①HPLC的UVD的光学系统。UVD的光学系统情况各异,形式多样,主要有以下几种。

1-低压汞灯;2-透镜;3-遮光板;4-测量池;5-参比池;6-紫外滤光片;

7-光电倍增管;8-双紫外光敏电阻;9-半透半反反射镜

图2-54 几种紫外吸收检测器的光学系统

(a)为没有参比池,只有以空气做参比的非对称双光路;(b)、(c)和(e)

为只有一个光源的单光源双光路;(d)为有两个光源的双光路

②国产优质、高信噪比(灵敏度)的UVD的光路。

下面是中国北京普析公司和中国大连依利特公司近几年推出的高信噪比、优秀的HPLC的UVD光路图。

a.普析公司的L600光路图如图2-55所示。

图2-55 国产L600型HPLC检测器的光路图

该检测器光学上的最大特点有四个。第一,为了加强或提高光源强度、降低光能量的损失,采用椭球镜,可以提高信噪比(提高仪器的灵敏度);第二,利用光束分列器引入一路光线,做成准双光束光路的参考光束,可以抵消一部分光源波动引起的整机不稳定;第三,成功地采用凹面光栅,减少了光能损失、降低了杂散光,也可以提高HPLC的信噪比,提高HPLC分析检测数据的可靠性;第四,采用“组合型氘-钨灯”,将氘灯和钨灯固化在一起,可以减少换灯时的光轴变化带来的光能量变化,提离分析测试的可靠性。

b.依利特公司HPLC的5100紫外检测器光路如图2-56所示。

图2-56 5100紫外检测器光路图

该检测器的优点有七个。

第一,优质的光路设计,降低了杂散光,保证了提升仪器信噪比;第二,可调的数据采集频率能够满足绝大多数客户的采集需求;第三,在190~800nm宽波长范围内,使用穿越式氘灯及钨灯结合的方式以获得最高的光能.和最低的检测限;第四,氘灯及钨灯前置使用更换灯源的操作更为简单快捷;第五,采用电机直接驱动光栅的方式,取代传统机械式正弦机构,实现精准的波长定位,具有极佳的波长准确性与重复性;第六,采用高品质的进口光栅、氘灯、钨灯,保障检测器高灵敏度、宽线性范围、长寿命的需求;第七,新增开机波长自校验功能,能够实现波长的自动校准,提高实验精度。

表2-6 5100的主要性能指标

③目前国内外几种主要UVD的最主要技术指标比较(表2-7)。

表2-7目前国内外几种主要UVD的最主要技术指标比较


从表2-7可知:第一,所谓“进口的HPLC就是比国产的好”是一个误区;表2-7就说明不是进口的HPLC检测器都比国产的HPLC好。例如,直接影响HPLC适用性范围的波长范围中,国产依利特的UV230、5100,普析的L600、福立的2200-2都可以达到700nm,而日本岛津的SPD-10AVP、安捷伦的1100都只能到600nm。因此,国产的这些HPLC可以分析检测强致癌物质孔雀石绿(680nm),但是有些波长上限不到700nm的进口HPLC就不能检测孔雀石绿。又如:直接影响使用者的分析误差的指标光谱带宽,国产依利特的UV230为6nm、普析的L600也是6nm,而日本岛津的SPD系列都是8nm,安捷伦的1100也是6.5nm。作者研究的结果:6nm的光谱带宽时分析测试时的相对误差为3. 6%;8nm的光谱带宽时分析测试时的相对误差为6.9%。第二,国产HPLC的性能技术指标表达比较规范。例如:依利特、普析、伍丰、福立等公司的噪声和漂移都实实在在地给出,而岛津则在指标后加括弧,说明要在指定条件下,但是又不说明什么指定条件。这就使人感到不可靠。还有漂移这个重要指标,国际上是约定前面不能加“±”符号的,但是岛津的SPD-10就加“士”符号,诸如此类。

特别值得提出的是,近几年来,国外HPLC的生产商在中国市场上宜传他们的HPLC仪器时,对各类检测器的性能技术指标都不给出,他们在文字上大吹大擂,什么“国际上独一无二”、什么“世界首创”等,同时给出一张没有仪器条件、没有样品浓度的色谱图,表面上非常好看,其实是在误导那些不了解情况,不熟悉产品的广大使用者。因为如果采用很浓的样品、很大的量程的话,几乎所有的中国国产的HPLC检测器都能作出那样的色谱图。所以,作者建议中国的广大读者千万不要上当。

评论

登录后才可以评论

立即登录
分享到微信
关闭
普天同创
请告知您的电话号码,我们将立即回电

通话对您免费,请放心接听

温馨提示:

1.手机直接输入,座机前请加区号 如18601949136,010-58103629

2.我们将根据您提供的电话号码,立即回电,请注意接听

3.因为您是被叫方,通话对您免费,请放心接听