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d. ELSD与几种常用的检测器之间的比较(如表2-9所示)。
表2-9 ELSD与几种常用的检测器之间的比较
e. UM5000型ELSD的应用实例。ELSD已被广泛应用于碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测。
第一,未衍生氨基酸的直接测定。氨基酸分析是食品、制药、生物等领域常用的分析项目。UM5000型ELSD检测器直接检测未经衍生的氨基酸,简单、实用。20种未衍生氨基酸分离图谱如图2-69所示。
图2-69 20种未衍生氨基酸分离图谱
色谱柱:ProntoSIL C18(250×4.6mm,5um)
流动相:A七氟丁酸:TFA:水=1.0:0.5:500:B甲醇
梯度洗脱程序:0~8min,0%B;8~11min,0%~22%B;11~21 min,22%~27%
B;21~30min,27%~55%B,保持至40min
流动相流速:0.8mL/min
蒸发管温度:40℃
载气流速:2.5L/min
样品:1.Gly;2.Ser;3.Asp;4.Gln;5.Thr;6.Ala;7.Glu;8.Cys;9.Cys-Cys;10.Pro;11.Lys;12.His;13.Val;14.Met;15.Arg;16.Tyr;17.Ile;18.Leu;19.Phe;20.Trp
第二,人工合成甜味剂检测结果如图2-70所示。
图2-70 人工合成甜味剂分离图谱
峰标识:1.杂质;2.磺胺-K;3.糖精纳;4.钠环烷;5.蔗糖;6.天门冬氨酸
条件:
柱:TOSOH TSK gel ODS-100V(15cm×4.6mm,3um);流动相:0.1%(v/v)调节PH=3.5的蚁酸缓冲液—甲醇(61:39,v/v);流速:0.7mL/min;ELSD carriergas flow:2.5L/min;蒸发温度40℃
第三,卡那霉素的分析和检测结果。2010版药典规定32种药品,102种产品采用ELSD检测,图2-71所示为卡那霉素的分析和检测情况。
图2-71卡那霉素的分离图谱
色谱柱:ProntoSIL CI 8(250×4.6mm,5um)
流动相:0.2moL/L三氟乙酸溶液-甲醇(95:5)
流动相流速:1mL/min
蒸发管温度:110℃
③Ms检测器。MS作为HPLC的一种质量型检测器,目前使用比较普遍。MS作为HPLC检测器的工作原理如下:试样在MS的离子源内与HPLC的流动相分离,并且被离子化;再经过质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开,然后经质谱检测器得到质谱图。HPLC-MS体现了色谱和质谱两种技术优势的互补:HPLC对复杂体系具有高分离能力,MS具有高灵敏度、能够提供相对分子质量和结构信息。二者结合,在很多复杂体系的分析检测中具有强大的生命力,可以广泛应用在食品、药品、环保和各种复杂体系的分析检测工作中。
目前MS的离子源己有重大突破和发展;例如电喷雾电离(ESI)、大气压化学电离(APCI)、热喷雾电离(TSP),基体辅助激光解吸电离(MALDD等电离方法的出现,使得质谱技术和色谱-质谱联用技术得到了飞速发展,为HPLC联用技术开辟了新天地,使得HPLC-MS进入了新的发展时代。
相关链接:HPLC几种最常用的主要检测器(四)
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