如何评价HPLC也同样是目前科技工作者面临的非常重要的问题之一。

我们应该如何评价HPLC仪器的优劣？什么是好的HPLC仪器？什么是不好的HPLC仪器？我们应该从哪些方面来评价HPLC仪器？

近几年来，国际上有很多科学家在写文章评价各类分析仪器的优劣，但是他们一般只从两个方面或三个方面评价。作者在前人的基础上，根据仪器学理论，结合自己在HPLC仪器的设计、制造、使用实践中的经验、教训，归纳总结了如何评价HPLC仪器的六个主要方面，简称“六性”。这个“六性”既是评价、挑选HPLC仪器的方法，也可以适用于其他所有分析仪器的评价和挑选。

1.适用性

什么叫适用性？所谓适用性，就是HPLC仪器能满足使用要求的程度。HPLC仪器的适用性的主要内容，就是满足使用者的分析误差要求。而使用者的分析误差是由样品前处理产生的误差、分析方法的理论误差、仪器性能技术指标产生的误差、使用者的操作(正确选择仪器条件等)引起的误差、环境影响(电磁场干扰、震动等)等引起的误差等构成的。单从仪器来讲，仪器的性能技术指标是起决定作用的。我们考虑适用性的原则应该是“能满足使用要求，不必苛求”。例如。在用HPLC仪器对不同试样进行比对测试时，HPLC检测器的波长准确度很重要。但在一般的定量相对测量时，波长准确度就不是很重要，这就要从满足使用要求的角度来考虑。又如波长重复性在发表文章时很重要，因为人家如果重复不了你的数据，甚至有时你自己也重复不了你自己的数据，那是不行的。例如，制药行业的某药厂质检部门，使用一台紫外检测器的波长准确度不合格的HPLC仪器检测某产品，再送上级药检部门检测，肯定会出现不合格的问题，所以重复性很重要。

又如噪声，它在HPLC仪器中非常重要，当使用者的试样较少、浓度较稀的时候，噪声更加重要。因为噪声是HPLC仪器分析测试误差的主要来源之一，它限制被分析试样浓度的下限。例如，一台HPLC仪器的噪声一定时，被测试的试样的浓度越稀，分析测试结果的数据偏离比尔定律的程度就越大，分析测试的误差就越大。所以，在所要求的分析误差一定时，被分析试样浓度的下限就会受到限制。因此，生化、海洋、药品、生命科学等领域，往往试样较少，故这些领域的科技工作者挑选HPLC仪器时，一定要注意挑选噪声小的仪器。

光谱带宽非常重要，它是制药行业挑选HPLC的UVD、FLD等检测器的重要性能技术指标之一，它直接影响使用者的分析误差，所以必须重视这些问题。我国和世界各国的药典都明文规定，用干药检的紫外可见分光光度计(包括HPLC的UVD)的光谱带宽要求为2 nm以下。主要原因是光谱带宽是分析测试误差的主要来源之一，不同的光谱带宽有不同的分析误差。每一种药品(或每一种式样)都有一个最佳分析光谱带宽，只有在这种最佳光谱带宽下分析测试，才能得到最小的分析误差。因此，药厂和药检部门都不宜选用固定光谱带宽的紫外可见分光光度计作检测器的HPLC和固定光谱带宽的专用UVD仪器，而应选用可变光谱带宽的吧 仪器或检测器。

很多HPLC使用者在购买HPLC时，总是希望指标越高越好，功能越全越好，其实不然，这样会造成很大的浪费。一般来讲，只要HPLC的指标能满足分析误差的要求就行了，不必苛求。从仪器学理论角度来看，一般的常规分析检测工作使用的HPLC，UVD检测器的噪声在1×10^-4左右，完全可以满足使用要求，因此，没有必要要求HPLC的噪声特别小。如此等等。所以适用性是评价、挑选HPLC仪器的最重要依据之一。

很多使用者买HPLC时，对功能技术指标要求越多越好、越全越好，对性能技术指标要求越高越好。实际使用时，功能技术指标很多却用不着。一般分析测试工作对HPLC的性能技术指标根本不需要那么高，对功能技术指标不需要那么全。因此，作者建议，考虑适用性的总原则应该是：能满足使用要求就行了，不必过分苛求。但是应该重视以下问题。

1.1 保证HPLC的适用性要注意的三个方面

(1)防止大材小用。某大学食品检验中心的常规分析检测和博士生写论文，都要求用高档HPLC，这是不必要的：常规分析检测和博士生的工作，使用一般的HPLC完全可以满足要求。许多人买很高档的HPLC却没有发挥作用，实际上一般的国产或进口HPLC完全能满足使用要求。如北京普析公司、上海伍丰公司、北京东西电子公司、浙江福立公司等的HPLC都能满足常规分析的使用要求。

(2)重视影响HPLC分析误差的因素。要搞清楚某台HPLC是否适用或其适用性强不强，首先要搞清楚影响适用性的因素。一般来讲，这些因素与影响分析误差的主要因素是密切相关的。我们可以暂不谈样品前处理、仪器安放的环境和仪器条件的选择等对分析误差的影响，单从仪器设计和使用的角度来看，影响HPLC适用性、影响HPLC分析误差的主要因素很多，最主要的大致有以下几个方面：高压泵的稳定性、色谱柱的质量、检测器的稳定性、检测器的噪声、检测器(光源、放大器等)的漂移。因此，要保证所设计或选择的HPLC仪器的适用性好，首先要重视或注意解决好这些问题。其次，适用性强不强还特别要看使用对象的使用要求能否真正得到满足，如仪器的灵敏度(检测限)、稳定性和仪器的各项功能等能否真正满足使用要求。

(3)重视调查研究和盲样测试。为了选择适用性强的HPLC仪器，使用者可以走访有关用户，了解他们的使用情况，以此作为评价、挑选HPLC的参考。使用者想买什么样的HPLC仪器，要多找使用过该仪器的用户了解，要多找几家同行了解。一般来讲，同行们对自己使用过的仪器，都应该对它的优缺点有所了解，同行的经验、教训是非常宝贵的，通过这样的调查了解，自然会得到比较可信的结果。

还可以采用“实际样品分析法”来挑选仪器。因为只有通过实际样品测试，才能真正知道某HPLC是否能满足使用者的使用要求。具体做法是：使用者可以选择一个或几个对自己来说是已知的样品(可以自己配制后经过标定待用，也可买标样)、而对制造厂商来说是未知的盲样，请几个制造厂商分析测试这些样品。然后看测试结果的准确度如何：哪个仪器的测试结果最能满足自己分析测试的准确度、重复性等要求，就在此基础上，再结合“六性”来考虑是否买该仪器。千万不要盲目买仪器。如果几个厂商测试的结果都能满足要求，使用者可从中择优购买。但是，必须要注意的是，提供的盲样一般要是“水样”。如果你提供一个固体样品给制造商去做，其结果就很难判断了，因为固体样品影响分析测试结果的因素太多，特别是固体样品的前处理产生的误差一般都可能会很大，因此很难说明分析测试结果的真实情况，很难用这种数据来判断HPLC仪器的优劣。

1.2 HPLC适用性的主要内容

(1)性能技术指标的适用性。

①首先要看HPLC的灵敏度或检测限是否能满足使用要求。如果样品稀少，则必须首先考虑HPLC的灵敏度，如果灵敏度达不到使用要求，就是最大的不适用。

②HPLC仪器的噪声(Noise, N)是否能满足使用要求。噪声是HPLC主要分析误差的来源，仪器有多大的N，它都直接累加在分析结果中，所以有多大噪声，分析数据中就增加多大误差。目前很多国外的HPLC仪器制造商，为了说明他们的HPLC的N很小，往往使用计算机对仪器的N进行平滑，再测出一个很小的N数据，其实硬件中的N依然存在，并且直接影响分析误差。前面所讲的HPLC检测三聚氰胺的例子，噪声的影响就很明显。

③量程能否满足使用要求。目前国内外有些HPLC仪器的UVD，因为噪声太大，所以其最灵敏量程只能到0.1～2.0AUFS(absorbance unit full scale)，而当今世界上最优秀的HPLC的量程可达到0.005～2.5AUFS(有些制造商给出0.005～3.0AUFS，这里的3.0是值得怀疑的，因为一般来讲，HPLC的UVD的杂散光都不会太小，所以检测上限很难达到3.0Abs)。尤其在生命科学研究领域，对HPLC的量程要求越宽越好，以确保能够分析测试很稀的样品。

④H PLC的线性动态范围能否满足使用要求：线性动态范围非常重要，很多HPLC的使用者不大重视这个问题。实际上，它决定了使用者能否保证使用在仪器的线性范围内；如果仪器的线性范围太小，就很难保证使用者在线性范围内使用，就很难保证分析测试结果满足分析误差的要求。所以，HPLC仪器的线性动态范围越大越好。

⑤HPLC高压泵的压力、流量范围是否能满足使用要求、能否作梯度分析。这方面需要看使用者的具体要求：如果是要求制备、收集样品，就必须选择大流量的高压泵；如果是做生命科学研究，往往要求高压泵的流量连续可调，甚至要求量程下限要达到0.001mL/min；如果做较复杂的样品分析，就必须要有梯度功能；有时使用者对高压泵的压力要求很严格。目前国际上商品HPLC泵的最高工作压力可以达到41.36MPa(5000psi)左右。

(2)功能技术指标的适用性。HPLC的功能技术指标的适用性主要指仪器的自动化程度、数据处理、软件界面等，它包括计算功能、控制功能、保护功能、数据保护功能等多方面。一般来讲，HPLC的功能多者好。但是，要根据使用者的使用要求来讲。我们挑选HPLC时，要注意功能技术指标，但不能过分求全。许多科技工作者手中的HPLC的功能并未完全得到使用，有的大部分没有使用，这是一种浪费。一定要根据使用者的具体要求来评价、挑选HPLC。例如，使用者若要知道被测样品中的某些组分的光谱特性，就应该挑选具有停泵扫描功能的检测器，否则就不适用。

HPLC仪器计算机的界面也是很重要的。我们国家希望进口的HPLC仪器的计算机最好做成中文界面，这是为了方便用户。但是，目前有些国产仪器，竟将计算机的界面做成英文，这就有些不妥。如果你要出口，那就把出口的仪器做成英文界面，不应把在中国市场上销售的国内用户使用的仪器做成英文界面：这是值得分析仪器制造厂商注意的问题。

综上所述，HPLC的功能技术指标非常重要，它是设计者、制造者应该特别重视的问题之一，也是使用者在评价、挑选HPLC仪器时应该特别重视的问题之一。