北京普天同创生物科技有限公司

  • CNAS实验室认可证书
  • 标准物质定级证书
  • 豫南检测资质认定证书
  • 质量管理体系认证证书
  • 农产品资质证书
  • 伟业计量高企认证证书
  • 中国计量测试学会合作单位
新闻
  • 产品
  • 仪器
  • 新闻
  • 证书
  • 规程
  • 帖子
  • 课堂

在线客服

在仪器学理论指导下认识、处理HPLC系统的各类问题

发布时间:2018-07-04 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:609

目前很多研发和使用HPLC的科技工作者,没有从仪器学理论上搞清楚或没有完全搞清楚HPLC中的高压泵、色谱柱、检测器三者的相互关系。研发、制造者因为没有搞清楚这三者的相互关系,所以研发、生产制造出的HPLC问题很多,不大好用或者不好用;使用者因为没有搞清楚这三者的相互关系,所以不能用好HPLC仪器,更不能将HPLC用到最佳水平,或者不能得到最佳的分析测试数据。作者积长期的实践,感到生产、使用HPLC时,以下问题特别值得重视。

1.正确认识HPLC的高压泵、色谱柱、检测器三者的相互关系

1.1 HPLC是一个系统

从仪器学理论来讲,只有将HPLC的高压泵、色谱柱、检测器三者(三个部件)结合起来才能叫HPLC;只有三者都合格,联机后的整机系统才有可能合格,但不能由此肯定该HPLC系统就会合格。只有高压泵、色谱柱、检测器三者质量都合格,并且三者联机后组成的系统的检测结果也合格,才能说明这台HPLC系统是合格的。

1.2 高压泵、色谱柱、检测器等三个部件都很重要

从仪器学理论来看,HPLC系统(整机)主要由高压泵、色谱柱、检测器三个部件组成。研发者、使用者在处理部件和整机关系时,不能偏重哪一方面,不能盲目地讲三者中谁是核心、谁最重要。目前,光谱、色谱工作者都经常从不同角度使用HPLC系统或其部件。例如,色谱工作者经常把光谱仪器(如紫外可见分光光度计、原子吸收分光光度计等)作为HPLC系统的检测器使用,他们说高压泵和色谱柱是最重要的,光谱仪器只是一个检测器而已;而光谱工作者则经常把HPLC的高压泵和色谱柱作为分离工具,他们却说光谱仪器是最重要的,高压泵和色谱柱只是一个分离手段而已。不同专业的科技工作者对问题有各自不同的看法,这应该说是正常的。从不同的角度对同一个问题的看法都各有表述,我们可以不必过多地去追究这些。但是作者认为,以上两种说法都比较片面,都有局限性。从仪器学理论角度来讲,正确的说法应该是三者缺一不可,三个部件都很重要。

1.3 三者必须联机调试、检测才能保证整机系统的质量

作者长期使用HPLC,并有多年研发HPLC仪器的工作经历,基于对仪器学理论的理解和作者应用实践的经验和教训,作者深深认识到:必须将三个部件连接起来调试和检验测试。只有三个部件与联机后的整机都能达到质量指标要求,才能说这台HPLC仪器达到了质量要求。否则,只是部件合格,整机系统不一定能合格,HPLC仪器不一定好用。为什么?因为:

(1)高压泵后面不接色谱柱时可能很稳定,但是接上色谱柱后,即使色谱柱是合格的,高压泵也可能会因为柱子连接时的某些问题(不匹配、微量漏液等)产生压力不稳、流量不稳定问题,会影响HPLC整机系统的质量。

(2)色谱柱对高压泵影响很大。即使高压泵合格、检测器也合格,但是色谱柱堵塞、色谱柱沾污、色谱柱接头漏液等,都会影响高压泵的压力波动,使流速不稳定;会影响系统不稳,使RSD变坏、峰拖尾、灵敏度降低。

(3)色谱柱对检测器影响很大。色谱柱的柱效降低(柱塔板数降低)、色谱柱堵塞、色谱柱的新旧程度、接头的质量、管道连接、流动相的流速、管道漏液等,都会影响检测器的检测限、分辨率、噪声和灵敏度。

(4)如果检测器的噪声太大,即使高压泵合格,色谱柱也很好,也会因为检测器的噪声,而使HPLC整机系统的检测限(灵敏度)降低;如果检测器的漂移和重复性(RSD)不好,也会使HPLC整机系统的稳定性变坏。

总之,高压泵、色谱柱、检测器三者必须联机测试检验,通过实际样品测试证明整机合格,才能说该HPLC系统合格,才有可能保证HPLC系统的质量。

2. 正确处理研发、生产和检验HPLC中普遍存在的各类问题

目前有些HPLC的生产商,在他们的生产车间里,将检测器和高压泵两个部件分开自检,各自合格后送质检部门检验。但在质检部门那里,则将高压泵、检测器和“工装色谱柱”三者联机检验,合格后入库。然后,仓库里将高压泵、未经检测的外购色谱柱、检测器三者成套出厂。作者认为,这样做存在很大的问题,不符合仪器学理论和用户实际使用的要求。我们不能用“工装色谱柱”检验HPLC系统,原因见1的“1.3”所述。

我们必须注意:色谱柱是易损件,用户经常会在色谱柱长时间使用后更换新柱,此时HPLC系统的高压泵和检测器基本进入了“电子元件失效理论的盆底”,HPLC系统比较稳定了。所以,不会因为换新色谱柱而产生仪器不能使用的问题。特别应该指出的是:用户换新色谱柱后,一般不再检测系统的综合性能技术指标;如果检测指标,可能就不能达到原出厂指标(因为高压泵和检测器经过较长期使用后,质量会有所下降,旧高压泵、新色谱柱、旧检测器三者不能达到最佳配备)。用户换新色谱柱不会影响使用的问题,可以从我国的计量认证检定规范(JJG)得到佐证;JJG也是一种检验标准,用该标准检验的仪器,很多是用户正在使用的仪器,JJG明确规定被检仪器的指标可以比新出厂的仪器指标低,甚至有些指标因为达不到质量要求而免检。但我们的制造企业,在仪器出厂前必须检测系统指标,只有系统指标达到设计要求时才算合格、才能出厂。至于用户更换新检测器、更换新高压泵,同样都是允许的。但是,如果要求检测换新高压泵或新检测器后整个HPLC系统的指标,则仍然必须要配置新色谱柱,必须是新色谱柱、新检测器、新高压泵三者联机检测指标合格才行。否则,系统的高压泵、色谱柱、检测器因使用时间长而指标下降,会使HPLC系统的检测结果达不到出厂要求或不合格;有些新仪器验收时就不合格,原因就在这里。此时用户会怪罪生产制造公司,认为是制造商提供的仪器不合格,这是不懂仪器学理论的结果,实在太不公平。

综上所述,作者认为HPLC的研发、生产者应该采取的正确做法是:高压泵、色谱柱、检测器在分开作部件检验后,再将三者联机检验整个HPLC系统,只有系统合格后,三者(三个部件)同时入库(编号),然后,三者成套出售,这样才能保证HPLC仪器的质量在用户那里是合格的。

评论

登录后才可以评论

立即登录
分享到微信
关闭
普天同创
请告知您的电话号码,我们将立即回电

通话对您免费,请放心接听

温馨提示:

1.手机直接输入,座机前请加区号 如18601949136,010-58103629

2.我们将根据您提供的电话号码,立即回电,请注意接听

3.因为您是被叫方,通话对您免费,请放心接听