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应用实例——中药分析

发布时间:2014-07-08 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:979

1.定性鉴别

以香连丸为例:

测定法:取本品约60mg,研细,加甲醇5ml,置水浴中加热回流15分钟,滤过,取滤液,补加甲醇使成5ml,摇匀,作为供试品溶液。另取黄连对照药材50mg,同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品,加甲醇制成每lml含O.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇一冰醋酸一水(7:l:2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上,显相同的黄色荧光斑点。

讨论:①黄连是香连丸的君药,小檗碱是黄连的主要成分之一。同时以黄连作为对照药材和以盐酸小檗碱作为对照品,通过对黄连药材的鉴别,以保证香连丸的质量。
②黄连中小檗碱及其相关成分,在紫外光照射下,可显黄色荧光,可方便地检视。
③中国药典2005年版中,以苯一乙酸乙酯一异丙醇一甲醇一浓氨溶液(12:6:3:3:1)

为展开剂,展开系统较为复杂,且使用了毒性较强的溶剂——苯,2010年版对展开剂进行了改进。

2.含量测定

(1)益母草流浸膏

测定法:取本品约5g,精密称定,用稀盐酸调节pH值至1~2,加在强酸性阳离子交换树脂柱(732型钠型,内径为2cm,柱高为15cm)上,以每分钟8ml的速度用水洗至流出液近无色,弃去水液,再以每分钟2ml的速度用2mol/L氨水溶液150ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇使溶解,转移至10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,静置,取上清液,作为供试品溶液。另取盐酸水苏碱对照品适量,精密称定,加甲醇制成每lml含2mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,精密吸取供试品溶液8μl,对照品溶液3μl与8μl,分别交叉点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇一乙酸乙酯一盐酸(8:1:3)为展开剂,展开,取出,晾干,在105℃加热15分钟,放冷,喷以稀碘化铋钾试液一1%三氯化铁乙醇溶液(10:1)混合溶液至斑点显色清晰,晾干,在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板,周围用胶布同定,照薄层色谱法进行扫描,波长:λS:510nm,λR=700nrn,测得供试品吸光度积分值与对照品吸光度积分值,计算,即得。

本品含盐酸水苏碱(C7H13NO2·HCl)不得少于0.20%。

讨论:①益母草中含水苏碱,与改良的碘化铋钾试剂反应,稳定性试验表明,显色斑点在45分钟内稳定。
②在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板,并用胶布密封固定,可防止显色试剂挥逸,以保证在测定时间内显色更为稳定。

(2)马钱子散

测定法:取装量差异项下的本品约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入三氯甲烷20ml,浓氨试液lml,轻轻摇匀,称定重量后,于室温放置24小时,再称定重量,用三氯甲烷补足减失的重量,充分振摇,滤过,滤液作为供试品溶液。另取士的宁对照品,加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,分别吸取供试品溶液8μl和对照品溶液4μl,交叉点于同一硅胶GF254一薄层板上,以甲苯一丙酮一乙醇一浓氨试液(16:12:1:4)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,照薄层色谱法进行扫描,波长:λS=257mn,λR=300nm。测量供试品与对照品吸光度积分值,计算,即得。
本品每袋含马钱子以士的宁(C21H22N2O2)计,应为7.2~8.8mg。
讨论:①马钱子中的士的宁碱是有效成分,但又是有毒成分,需进行含量测定,并应控制士的宁的上限量,薄层色谱法操作简便,结果完全可以达到要求。
②采用硅胶GF254荧光板,以便于扫描定位。
③如用外标二点内插法可减少误差,但本品含量较高,单点法也可得到满意结果。

3.薄层色谱指纹图谱

(1)凌霄花药材
取本品粉末约0.5g,加石油醚(60—90℃)15ml,超声处理15分钟,滤过,弃去滤液,药渣加甲醇15ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇lml使溶解,作为供试品溶液。另取凌霄花对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。取供试品和对照液各2μl;条带状点样于以羧甲基纤维素钠为黏合剂的高效硅蹿G薄层板上,条带宽度为6mm,条带问距为6mm,原点距底边10mm。置双槽展开缸中,以三氯甲烷一甲醇(9:1)为展开剂。上行展开约8cm。取出,晾干,置碘蒸气中熏至斑点显色清晰。在可见光下检视斑点,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,应显相同颜色的斑点。

(2)人参、西洋参与三七荧光平面色谱图像

利用优化的色谱条件获得人参类药材的薄层色谱图像所提供的鉴别信息用文字很难描述。然而像一幅图画+样的薄层荧光彩色图谱却能生动地展现所有人参类药材(人参、西洋参、三七)所共同含有的主要人参皂苷成分如人参皂苷Rb1Rd、Re、Rg1的存在,而且还展示了在同属不同种药材之间各种人参皂苷的分布及有无的异同,如人参含有人参皂苷Rf,西洋参却不含,西洋参含伪人参皂苷F11。人参却检不出该荧光斑点。三七完整的色谱图像相对比较简单,而且含特征的三七皂苷R1。

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