抗原与抗体的结合反应是一切免疫测定技术的最基本原理。在此基础上结合一些生化或理化方法作为信号显示或放大系统即可建立免疫测定法，如放射免疫测定法、酶免疫测定法、荧光免疫测定法等。人们一直在不断寻找新的显示方法应用于免疫检测技术，其方法学研究和实际应用十分活跃。

一个成功的免疫测定法必备三个要素：性能优良的抗体、灵敏和专一性的标记物和高效的分离手段。

抗原与抗体的结合反应是依靠局部(抗原决定簇和抗体结合位点)的分子间作用力结合的。其作用力主要有：氢键、范德华力、盐键、疏水相互作用。形成稳定的作用力要求抗体结合位点和抗原决定簇的空间结构高度互补，而且其接触表面基团分布要两相配合。

现有的主要免疫测定法如表5-1所示。按照是否使用标记物分为标记免疫测定法和非标记免疫测定法，后者又称为经典免疫测定法；按反应介质分为均相或非均相(免疫复合物需分离后检测)免疫测定法；按反应状态分为平衡态或非平衡态免疫测定法。按照标记物种类，标记免疫测定法又分为放射性标记测定法和非放射性标记测定法。

表5-1 免疫测定方法分类

经典免疫测定法灵敏度较低，在残留分析中极少应用。放射性标记测定法因辐射污染和试剂寿命等问题已逐渐淘汰。非放射性免疫测定法种类繁多，发展较快，包括各种酶免疫测定法、荧光免疫测定法、化学发光免疫测定法、脂质体免疫测定法等。非均相方法需要免疫复合物分离步骤，适用范围广泛；均相方法不需要分离，易实现自动化，但灵敏度不如非均相方法，标记物易受样品基质的影响，适用范围小。

文章来源：《食品质量与安全检测技术》

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