本法是国际标准化组织(ISO)，联合国粮农组织和世界卫生组织(FA0／WHO)为乳及乳制品定量检测的国际标准方法，适用于各种液状乳(生乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等)、各种炼乳、乳粉、奶油及冰淇淋等在碱性溶液中溶解的乳制品，也适用于豆乳或加水后呈乳状的食品。本法利用氨乙醇溶液将乳类胶体性状及脂肪球膜破坏，将其中非脂成分溶解于氨一乙醇溶液中，使脂肪游离出来，再用乙醚一石油醚提取出脂肪，回收溶剂后，残留物恒量即为乳脂肪。

1．操作步骤

牛乳10.OOmL或精密称取乳粉约1.OOg，用10mL60℃水，分数次溶解于抽脂瓶中，加入1．25mL氨水，充分混匀，置于60℃水浴中加热5min，再振摇2min，加入10mL乙醇，充分摇匀，于冷水中冷却后，加入25mL乙醚，振摇30s，加入25mL石油醚，再振摇30s，静置30min，待上层液澄清时，读取醚层体积，放出一定体积醚层于已恒量的烧瓶中，蒸馏回收乙醚和石油醚，挥干残余醚后，放入(100±5)℃烘箱中干燥1.5h，取出放入干燥器中冷却至室温后称重，重复操作直至恒量。

2．结果计算

X=m2-m1/m*v/v1*100

式中 X——样品中脂肪的质量分数，％；
m2——烧瓶和脂肪的质量，g；
m1——烧瓶质量，g；
m——样品质量，g(或mL／相对密度)；
V一读取醚层总体积，mL；
V1——放出醚层体积，mL。

3．试剂

①25g／L％氨水(相对密度O.91)。

②96％乙醇。

③乙醚(不含过氧化物)。

④石油醚(沸程30～60℃)。

4．仪器

具塞量筒或抽脂瓶。

5．注意事项

①乳类脂肪因脂肪球被乳中酪蛋白钙盐包裹，存在于高度分散的胶体分散系中，不能直接被乙醚、石油醚提取，需先用氨水处理，再用乙醚提取，故此法也称为碱性乙醚提取法。

②乙醇的作用是沉淀蛋白质以防止乳化，并溶解醇溶性物质，使其留在水中避免进入醚层，影响结果。

③加入石油醚可以降低乙醚的极性，避免乙醚与水混溶，便于乙醚提取脂肪，并可使分层清晰。

④对已结块的乳粉，用本法测定脂肪，其结果往往偏低。