(一)食品维生素A及维生素E的测定——高效液相色谱法原理

样品中维生素A及维生素E经皂化提取处理后，将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中。用高效液相色谱法C18反相柱将维生素A和维生素E分离，经紫外检测器，用内标法定量测定。

本法摘自GB／T 5009．82—2003，适用于各种食物和饲料中维生素A和维生素E的同时测定。

(二)注意事项

①定性方法采用标准物色谱图的保留时间定性，定量方法采用内标两点法进行定量计算。先制备标准曲线，根据色谱图求出某种维生素峰面积与内标物峰面积的比值，以此值在标准曲线上查到其含量。或用回归方程求出其含量。用微处理机两点内标法进行计算时，按其计算公式由微机直接给出结果

②维生素A极易被光破坏，实验操作应在微弱光线下进行，或用棕色玻璃仪器，避免维生素的破坏。

 ③本法不能将β生育酚和γ生育酚分开，故γ生育酚峰中含有β生育酚峰。

④皂化法适用于维生素A含量不高的样品，可减少脂溶性物质的干扰，但操作费时，且易导致维生素A的损失。

⑤IU是国际单位。1IU的维生素A相当于0．3／μg的维生素A；IIU的维生素E相当于1mg的维生素E。

测定食品中的维生素A和维生素E的其他方法

1．三氯化锑比色法测定维生素A

测定维生素A可以采用比色法：即维生素A在三氯甲烷中与三氯化锑相互作用，产生蓝色物质，其深浅与溶液中所含维生素A的含量成正比。该蓝色物质虽不稳定，但在一定时问内可用分光光度计于620nm波长处测定其吸光度。

由于维生素A与三氯化锑生成的蓝色物质很不稳定，要在6s内完成吸光度的测定，否则蓝色反应逐渐消失，使结果偏低。因此，该测定方法受到限制。

2．比色法测定维生素E

利用维生素E将三价铁还原成二价铁，在pH值2～9范围内，二价铁与邻菲罗啉反应生成橙红色的配合物，在510nm波长处，测定溶液的吸光度。

3．荧光法测定维生素E

样品经皂化、提取、浓缩处理后，用正己烷提取不可皂化部分。在295nm激发波长、324nm的发射波长下，测定其荧光强度，与标准曲线比较，从而计算出样品中维生素E的含量。