一、概述

硝基呋喃类(nitrofurans, NFs)药物包括呋喃唑酮(furazolidone),呋喃西林(nitrofural),呋喃妥因(nitrofurantoin)等。硝基呋喃的分子式为：C₈H₇N₃O₅分子量225.16，为黄色粉末或结晶性粉末，无臭，味苦，能溶于二甲基甲酰胺，在水、乙醇或三氯甲烷中微溶，溶点253～257℃(分解)，其结构式为：

硝基呋喃类药物和代谢物均可以使实验动物发生癌变和基因突变。国际食品法典委员会(CAC)、中国和欧美等国禁止使用此类兽药，MRL值为不得检出。

硝基呋喃类药物在动物体内代谢迅速，难于检测，但其代谢产物能够与组织中蛋白质紧密结合，且毒性更强，是硝基呋喃类药物的残留标示物。呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮的代谢产物分别为3-氨基-2-噁唑酮(AOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基-乙内酰脲(AHD)、5-吗啉甲基-3-氨基-2- 噁唑烷基酮(AMOZ)。

硝基呋喃类药物残留检验方法有HPLC法、LC-MS、LC-MS/MS和ELISA法等。ELISA法常用于硝基呋喃类药物残留快速筛选检验。HPLC法是实验室常用方法， LC-MS和LC-MS/MS是确认方法。本章介绍ELISA法。

二、畜禽肉中呋喃唑酮残留标示物测定

1．原理样品中加入苯甲醛，与其中呋喃唑酮残留的标示物3-氨基-2-噁唑烷酮衍生化，衍生物经提取后，与结合在酶标板上的抗原共同竞争抗体，再与酶标形成的酶标记抗原-抗体复合物与显色剂反应，用酶标仪测定吸光度值，计算样品中3-氨基-2-噁唑烷酮(AOZ)的含量。

2．分析步骤

(1)样品的制备：取适量新鲜或冷冻空白和待测样品，去除脂肪和筋膜(鱼肉去皮)，绞碎匀质。-20℃储存备用，可保存6个月。

(2)提取：准确称取匀质样于塑料离心管中，加入三羟甲基氨基甲烷溶液漩涡混匀，于60℃恒温水浴孵育3小时，冷却至室温，提取液中加入盐酸溶液、衍生液，充分振荡，置37℃恒温水浴孵育12小时，冷却至室温，取一定量提取液，漩涡混匀，用氢氧化钠溶液调pH至7.0±0.2，于4℃离心。取上清液供测定。

(3)测定：将若干孔条插入微孔架，依次向微孔中加入一定量标准溶液和样品溶液；然后加入抗体工作液，充分混匀后，置于湿盒中，37℃恒温水浴孵育1小时。弃去孔中液体，再将酶标板倒置在吸水纸上拍打，重复洗板3次。加入酶标抗体工作液，置于湿盒中，37℃恒温水浴孵育1小时，按上述方法洗板5次。然后加入底物液，置于湿盒中，37℃恒温水浴孵育，最后加入终止液；在450nm波长处，用酶标仪测定吸光度值，在加入终止液60分钟内读取吸光度值。

取各浓度标准溶液，按上述方法测定，计算百分吸光度值。以标准溶液浓度的自然对数为横坐标，百分吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。本法中百分吸光度值为标准或样品溶液的平均吸光度值除以试剂空白的平均吸光度值，它与溶液中AOZ浓度的自然对数成反比。

3．方法说明

(1)本法适用于猪和鸡的肌肉及肝组织、鱼肉组织中呋喃唑酮残留标示物3-氨基-2-噁唑烷酮测定。本方法的检出限为0.15ug/kg；定量限为0.25ug/kg。

(2)本法所有操作应在室温(20～25℃)下进行。呋喃唑酮残留标记物试剂盒中所有试剂均应回升至室温后方可使用。

文章来源：《食品理化检验》

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