北京普天同创生物科技有限公司
以基因工程为核心的生物技术是一个新兴的技术领域。转基因生物技术有提高农作物产量和改善品质、减少除虫剂或除草剂使用、增加某些营养成分含量等优点。但同时由于转基因生物的健康风险和环境危害等具有不确定性,公众对转基因产品安全性的关注与日俱增。为了加强农业转基因生物安全管理,保障公众健康和动植物、微生物安全,保护生态环境,促进农业转基因生物技术研究,我国颁布了《农业转基因生物安全管理条例》和《农业转基因生物标识管理办法》,对农业转基因生物安全实行分级管理、安全评价和标识制度。对转基因食品实行管理和安全性评价的前提是对食品中转基因成分进行检测,确定其是否为转基囚食品(定性鉴定)及其含量(定量分析)。因此,对食品中转基因成分进行检测是非常必要和重要的。
一、转基因食品相关定义
1.转基因生物(genetically modified organism, GMO)指利用基因工程技术(gene engineering)改变基因组构成,用于农业生产或者农产品加工的动植物、微生物及其产品。其中主要是转基因植物。
2.转基因食品(genetically modified food, GMF)指利用基因工程技术改变基因组构成的动物、植物和微生物生产的食品和食品添加剂,包括:①转基因动植物、微生物产品,如转基因大豆;②转基因动植物、微生物直接加工品,如由转基因大豆加工的大豆油;③以转基因动植物、微生物或者以其直接加工品为原料生产的食品和食品添加剂,如用转基因大豆油加工的人造奶油等。转基因食品主要指用作食品的转基因植物。
3.转基因成分(genetically modified component)物种本身不具有的,而是来源于其他物种的功能基因序列。亦称外源基因成分。
二、转基因食品特征
转基因食品一般具有原有食品的基本性状,并包含外源基因及其表达产物,具有以下几方面特性:①产品具有食品或食品添加剂的特征,具有其原有基因所表现的性状和功能;②产品中存在外源DNA,并且基因组构成发生了改变,其成分中存在外源DNA的表达产物及其生物活性。
基因工程技术为了将具有应用价值的外源目的基因导入受体,并获得稳定整合和表达,需要将外源基因通过一定的技术插入到表达载体上构成基因重组体。外源DNA构成的植物基因重组体元件包括以下几种。
(1)载体(vector):特殊的能自我复制的DNA,将目的基因转移至受体细胞的运载工具。通过载体本身对受体生物细胞的转化或转染作用,携带基因重组体进入受体细胞。
(2)目的基因(target gene):以修饰受体细胞遗传组成并表达其遗传效应为目的,与转基因生物的性状改变直接相关的DNA片段。转入的目的基因能使转基因植物获得抗虫害、抗病毒、抗除草剂等性状。目的基因可以从动物、植物和微生物中提取获得,也可人工合成。常见的目的基因有:苏云金杆菌杀虫(bt)基因、豇豆胰蛋白酶抑制(cpti)基因、植物凝集素基因(lectin gene)、病毒外壳蛋白(coat protein, CP)基因、病毒卫星RNA(satellite RNA, Sat-RNA)、病毒非结构蛋白基因(特别是复制酶基因)等。为了使植物获得其他性状,还有许多目的基因可开发利用。
(3)调控元件(regulatory element):在构建基因重组体时,为使目的基因表达能精确开始和终止,并使目的基因表达增强,常使用启动子(promoter)和终止子(terminator)调控元件。启动子是一类为目的基因转录提供起始信号和起始位点的特殊核苷酸序列。常用的启动子有:花椰菜花叶病毒35S启动子、农杆菌冠瘿碱合成酶启动子、章鱼碱合成酶启动子等。终止子是一类为目的基因转录提供终结信号和终止位点的特殊核苷酸序列。常用的终止子有:胭脂碱合成酶终止子、花椰菜花叶病毒35S终止子和章鱼碱合成酶终止子。
图12-1 基因重组体示意图
(4)标记基因(marker gene)和报告基因(reporter gene):标记基因是基因重组过程中进行标记以便筛选转化细胞的构件,使之与非转化细胞分离。转化细胞携带各种抗性标记基因,从而具有了某些抗性,如抗生素抗性、除草剂抗性等。报告基因是一种编码某种易于检测蛋白质或酶的基因,通过它的表达产物来标定目的基因的表达调控。其优点是高灵敏度、可信性及检测方便且适合大规模检测。目前植物基因工程中使用的报告基因主要有:β-葡萄糖苷酶(gus)基因、氯霉素乙酸转移酶(cat)基因、冠瘿碱合成酶基因等。近年来,绿色荧光蛋白(gfp)基因作为一种新型的报告基因在植物基因转化及基因表达调控研究中得到应用并显示出其优越性。
外源基因表达产物主要包括目的基因、标记基因和报告基因表达的蛋白,或意外未知表达的蛋白。这些外源基因及表达产物使得转基因食品具有与其相对应的传统食品所不同的生物特性和由此产生的安全性问题。利用转基因食品的这些特点,可以对食品中转基因成分进行检测。
文章来源:《食品理化检验》
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