7 测定步骤

7.1 提取

7.1.1 牛奶

称取4g，准确至0.01g，牛奶样品于50 mL具塞离心管中，加入20 mL乙腈振荡提取2 min后，3000r/min离心10 min，移取上清液过滤至鸡心瓶中。再用10 mL乙腈重复提取一次，合并上清液于同一鸡心瓶中。

7.1.2 奶粉

称取0.5g，准确至0.01g，奶粉样品，加入4 mL水于50 mL具塞离心管中，混匀。加入20 mL乙腈振荡提取2 min后，3 000 r/min离心10 min，移取上清液过滤至鸡心瓶中。再用10 mL乙腈重复提取一次，合并上清液于同一鸡心瓶中。

7.2 净化

将提取液于45℃下旋转蒸发至约4 mL左右，加入2 mL磷酸盐缓冲液(4.9),混匀后，转移到已条件化的HLB固相萃取柱(4.15)上，再用2 mL磷酸盐缓冲液洗涤鸡心瓶两次，洗液一并转移到柱上，以小于2 mL/min流速滴下。接着依次用3 mL水和2 mL甲醇-水溶液(4.7)淋洗并抽干柱，最后用6 mL乙腈洗脱并收集于10 mL带刻度的玻璃管中(此过程流速小于2mL/min)。洗脱液在45℃水浴上氮气吹至约1 mL，用甲酸胺溶液(4.10)定容至2 mL，涡旋混合后，过0.45 um滤膜供HPLC-MS-MS分析。

7.3 空白基质溶液的制备

将取牛奶阴性样品4g，奶粉阴性样品0.5g，精确到0.01g，按7.1和7.2操作。

7.4 测定条件

7.4.1 液相色谱参考条件

液相色谱参考条件如下：

a)色谱柱：苯基柱，5 um,150 mm×2.1 mm(内径)或相当者；

b)色谱柱温度：30℃；

c)进样量：15 uL;

d)流动相梯度及流速见表1。

表1 液相色谱梯度洗脱条件

7.4.2 质谱参考条件

质谱参考条件如下：

a)离子化模式：电喷雾正离子模式(ESI+) ;

b)质谱扫描方式：多反应监侧(MRM);

c)鞘气压力：104 kPa ;

d)辅助气压力：138 kPa;

e)正离子模式电喷雾电压(IS): 4000V;

f)毛细管温度：350℃；

g)源内诱导解离电压：10V;

h)Q1为0.7,Q3为0.7;

i)碰撞气：高纯氨气；

i)碰撞气压力：0.2Pa;

k)参考保留时间、监测离子对和裂解能量见表2。

表2 参考保留时间、监测离子对和裂解能量

相关链接：牛奶和奶粉中螺旋霉素、吡利霉素、竹桃霉素、替米卡星、红霉素、泰乐菌素残留量的测定（一）

文章来源：《常用兽药残留量检测方法》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。