一、案例

有机氯农药和拟除虫菊酯农药是我国常用的两类农药。有机氯农药属于高残毒农药，其中六六六、DDT等我国早已禁用，但至今仍有违规使用的情况，果蔬及粮、谷、薯、茶、烟草都可残留有机氯，禽、鱼、蛋、奶等动物性食物污染率高于植物性食物，而且不会因其储藏、加工、烹调而减少，很容易进入人体积蓄。拟除虫菊酯杀虫剂主要用于防治棉田、菜地、果树和茶叶上的农业害虫以及卫生害虫，也用于渔业生产上杀灭寄生虫。拟除虫菊酯类农药因其高效低毒而得到广泛使用，是传统有机磷农药的替代品，这类农药也都具有一定毒性，尤其对鱼类毒性很高，且有一定蓄积性。

二、选用的国家标准

GB／T 5009．146—2008植物性食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留量的测定——粮食、蔬菜中16种有机氯和拟除虫菊酯农药残留量的测定。

三、测定方法

1．试样制备与提取

取粮食试样经粮食粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样。

(1)蔬菜试样 擦净去掉非可食部分后备用。称取20g蔬菜试样。置于组织捣碎机中，加入30mL丙酮和30mL石油醚，于捣碎机上捣碎2min，捣碎液经抽滤，滤液移入250mL分液漏斗中，加入100mL 2％硫酸钠水溶液，充分摇匀，静置分层，将下层溶液转移到另一250mL分液漏斗中，用2×20mL石油醚萃取，合并两次萃取的石油醚层，过无水硫酸钠，于旋转蒸发仪上浓缩至10mL。

(2)粮食试样 称取lOg粮食试样，置于100mL具塞锥形瓶中，加入20mL石油醚，于振荡器上振摇0.5h。

2．净化与浓缩

(1)色谱柱的制备 玻璃色谱柱中先加入1cm高的无水硫酸钠，再加入5g 5％水脱活弗罗里硅土，最后加入1cm高的无水硫酸钠，轻轻敲实，用20mL石油醚淋洗净化柱，弃去淋洗液，柱面要留有少量液体。

(2)净化与浓缩准确吸取试样提取液2mL，加入已淋洗过的净化柱中，用100mL石油醚一乙酸乙酯(95+5)洗脱，收集洗脱液于蒸馏瓶中，于旋转蒸发仪上浓缩近干，用少量石油醚多次溶解残渣于刻度离心管中，最终定容至1.0mL，供气相色谱分析。

3．测定

(1)气相色谱参考条件

①色谱柱：石英弹性毛细管柱，O.25mm(内径)×15m，内涂有0V一101固定液。

②气体流速：氮气40mL／min，尾吹气60mL／min，分流比1:50。

③温度：柱温自180℃升至230℃保持30min；检测器、进样口温度250℃。

(2)色谱分析 吸收1µL试样注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时问和峰高，再吸收1µL混合标准使用液进样，记录色谱峰的保留时间和峰高，根据组分在色谱上的出峰时问与标准组分比较定性，用外标法与标准组分比较定量。

4．结果计算

X=hi*mis*V2/his*V1*m*K

式中X——试样中农药的含量，mg／kg；

hi——试样中i组分农药的峰高，mm；

mis——标准样品中i组分农药的含量，ng；

V₂——最后定容体积，ml；

V₁——试样进样体积，µL；

his——标准样品中i组分农药的峰高，mm；

m——试样的质量，g；

K——稀释倍数。

5．试剂

①石油醚：沸程60～90℃，重蒸。

②苯：重蒸。

③丙酮：重蒸。

④乙酸乙酯：重蒸。

⑤无水硫酸钠。

⑥弗罗里硅土：层析用，于620℃下灼烧4h后备用，使用前于140℃下烘2h，趁热加5％水灭活。

⑦农药标准品。

⑧标准溶液：准确称取不同农药标准品，分别用苯溶解并配制成1mg／mL储备液，使用时用石油醚配成单品种标准使用液，再根据各农药品种在仪器上的响应情况吸取不同量的标准储备液，用石油醚稀释成混合标准使用液。

6．仪器

①气相色谱仪：附电子捕获检测器(ECD)。

②电动振荡器。

③组织捣碎机。

④旋转蒸发仪。

⑤过滤器具：布氏漏斗(直径80mm)、抽滤瓶(20mL)。

⑥具塞锥形瓶：100mL。

⑦分液漏斗：250mL。

⑧色谱柱。