北京普天同创生物科技有限公司
1 范围
本标准规定了进出口乳及乳制品中四环素类药物残留测定的制样和放射受体分析方法。
本标准适用于鲜奶、奶粉、乳清粉中四环素、土霉素、金霉素、强力霉素药物残留的筛选检测。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3 试样制备和保存
3.1 试样制备
从混合原始样品中取出部分代表性样品,奶粉、乳清粉不少于500 g,鲜奶不少于500 mL,均分两份,装入洁净容器内作为试样,加封并标明标记。制样过程中应防止样品受到微生物或化学物的污染或发生残留物含量的变化。
3.2 试样保存
干粉样品室温密封保存,液体样品0℃~4℃冷藏可保存5d,-15℃以下冷冻可保存2个月。
4 检测方法
4.1 方法提要
测定的基础是竞争性受体免疫反应。当样品中含有四环素类抗生素时,样品中四环素类抗生素残留物与受体上的结合位点结合,从而阻止了[3H]标记的四环素与受体试剂位点的结合。样品中的四环素类药物含量越高,竞争的结合位点越多,[3H]标记的四环素结合的则越少,用液体闪烁计数仪测定样品中[3H]含量的cpm值(count per minute,即每分钟脉冲数)越低。样品中四环素类抗生素残留量与cpm值成反比。
4.2 试剂与材料
除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
4.2.1 牛奶中的四环素类抗生素Charm Ⅱ放射免疫试剂盒(MRLs Competitive Assay):药片标识为T。
4.2.1.1 受体试剂药片:于-15℃以下冷冻保存。
4.2.1.2 [3H]标记的四环素药片:于-15℃以下冷冻保存。
4.2.2 阴性对照奶粉:被证实不含抗生素的奶粉。
4.2.3 土霉素标准品。
4.2.4 闪烁液。
4.2.5 硅硼酸盐玻璃试管及试管塞。
4.2.6 具塞塑料离心管,50 mL。
4.2.7 药片压杆。
4.3 仪器和设备
4.3.1 液体闪烁计数仪:Charm Ⅱ 7600分析仪。
4.3.2 分析天平:感量为0.01g和0.1mg。
4.3.3 离心机:大于3400 r/min。
4.3.4 涡旋混合器。
4.3.5 恒温加热器:80℃±2℃, 35℃±1℃。
4.3.6 微量移液器:20 uL~100uL,200uL~1000uL,1000uL~5 000uL。
文章来源:《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》
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